传染性胰腺坏死病毒VP2COE蛋白单克隆抗体的制备及与初步应用

为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用。实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合。采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为5G10和5F3,亚类鉴定均为IgG1亚类。2株杂交瘤细胞的染色体数目在75～120之间。间接ELISA检测5G10和5F3细胞培养上清的效价分别为1∶105、1∶102,腹水效价分别为1∶108、1∶104。Western-blotting和间接免疫荧光鉴定结果显示,2株单抗均能特异性地识别IPNV。间接ELISA表明,2株单抗不与IHNV、VHSV、SVCV、HRV等病毒反应,说明获得的单抗具有高度的特异性。相加ELISA实验结果显示,2株单克隆抗体分别识别IPNV VP2蛋白上不同的抗原位点。应用间接免疫荧光方法对临床确定为患有IPN虹鳟肝组织进行检测,结果证实该2株单克隆抗体可用于后续实验。     

南岭自然保护区低山天然常绿阔叶林植物群落特征分析

基于野外样方调查,分析了南岭国家级自然保护区海拔400～500m的低山常绿阔叶林群落结构特征和植物多样性。结果表明,样方内分布有乔木59种,分属于30个科;优势种类包括胡氏青冈、甜槠、桂花、猴欢喜、红背栲、山杜英、鹿角栲、槛木、白锥、皂荚等;以物种多度为定量指标计算各群落相似性为0～0．61,相邻号样方的群落相似性系数较大;各群落物种丰富度为11～23种,辛普森指数4．97～21．85,香农一威纳指数2．78～4．38;以P指数0．15～0．66,JSW指数0．77～0．94。