有机硅助剂在苹果炭疽叶枯病化学防控中的减药增效作用评价

有机硅助剂具有低毒、易降解的特性,可提高农药的药液展布性和渗透性。本研究分别采用室内离体叶片法和田间试验评价了2种有机硅助剂对吡唑醚菌酯和代森锰锌防治苹果炭疽叶枯病的减药增效作用。室内离体试验结果表明,杀菌剂浓度减半的处理以及模拟雨水冲刷处理均导致吡唑醚菌酯和代森锰锌的防效显著下降;而添加了有机硅助剂后,2种处理的防效显著提高,并且恢复到与正常施药量相同的水平。田间试验结果表明,正常情况下杀菌剂浓度减半后防效显著下降;而施用有机硅助剂后,浓度减半的吡唑醚菌酯和代森锰锌的防效显著高于不施用有机硅的处理。本研究结果表明,施用有机硅助剂可以在减少化学农药实际用量的情况下,保持较高的防效,这对于化学农药的减施增效具有重要意义。     

我国苹果斑点落叶病菌携带dsRNA分析及一种dsRNA病毒的鉴定

【目的】苹果斑点落叶病在我国各苹果主产区均有发生,给苹果产业造成了严重的经济损失。苹果斑点落叶病是由链格孢苹果专化型（Alternaria alternata f. sp. mali）侵染引起的一种气传病害。本研究旨在探明我国苹果斑点落叶病菌携带dsRNA的情况,为田间防治斑点落叶病提供新的生防资源,并为病毒的多样性以及进化研究提供新的认识。【方法】从全国8个省份采集有典型症状的组织样本,通过组织分离和单孢分离法获得纯培养;通过dsRNA的提取及凝胶电泳明确我国苹果斑点落叶病菌携带dsRNA的情况;通过菌株培养特性、菌丝生长速率、在果实及叶片上的致病力测定揭示携带dsRNA病原菌的生物学性状;通过高通量测序技术、分子克隆技术对QY-2菌株携带的dsRNA病毒进行全基因组序列、基因组结构和系统进化分析。【结果】自我国苹果产区获得102株苹果斑点落叶病菌菌株的纯培养,通过dsRNA的提取及凝胶电泳明确了5个菌株带有明显的dsRNA条带,携带的dsRNA分为4种类型,类型I（菌株YT-3-7）dsRNA在8、2.5和1.5 kb左右;类型II（菌株SJZ-4）dsRNA在8 kb左右;类型III（菌株QY-2）dsRNA在3和0.8 kb左右;类型IV（菌株CL-2-6和SQ-1-1）dsRNA在2.5和1.5 kb左右。含有dsRNA的菌株培养性状多样,菌落特征、生长速率与dsRNA携带与否及类型没有明显的关系,含有dsRNA的菌株大多属于弱致病力菌株。QY-2在叶片和果实上的致病力均最弱,确定其携带的dsRNA病毒基因组包括5个dsRNA片段,分别为dsRNA1—dsRNA5,片段大小依次为3 665、3 054、2 824、2 819、831 nt,提交至GenBank,登录号分别为MK672910、MK672913、MK672912、MK672911、MK836314。编码蛋白的分子量依次为124、83、84、83、13 kD。经系统进化关系分析,与Alternaria alternata chrysovirus 1遗传关系最近,确定其为产黄青霉病毒科（Chrysoviridae）、β产黄青霉病毒属（Betachrysovirus）的Alternaria alternata chrysovirus,暂定命名为Alternaria alternata chrysovirus 2（AaCV2）。【结论】我国苹果斑点落叶病菌携带dsRNA群体多样,dsRNA的有无及类型与寄主病原菌培养性状没有明显相关性,携带dsRNA的菌株多为弱致病力菌株,致病力最低的QY-2菌株携带AaCV2。该菌株的弱致病力可能具有潜在的应用价值,可为苹果斑点落叶病提供新的生防资源。     

苹果锈果类病毒在7个品种苹果上的分子变异及系统发育关系

【目的】探究不同品种苹果锈果类病毒（apple scar skin viroid,ASSVd）的分子变异及系统发育关系,为进一步揭示ASSVd分子变异机制打下基础。【方法】以富士、斗南、王林、中秋王、金冠、信侬红和信侬黄7个品种的染病苹果组织为材料,通过特异性引物对ASSVd全基因组序列进行扩增,然后进行分子克隆和序列测定,利用生物学软件DNAMAN对变异序列一致性进行分析并利用生物学软件MEGA构建系统发育树。【结果】共获得210个ASSVd的基因组序列,共计17种变体,大小为325—333 nt。将不同苹果品种获得的17种变体与其他已发表代表性分离物进行分析发现,所有变体被分为3组,组Ⅰ包括10种变体,同已报道的保定富士分离物（KR264032.1）亲缘关系较近;组Ⅱ包括6种变体单独聚类;组Ⅲ包括1种变体,与新疆红富士苹果上的分离物（EU031455.1）亲缘关系较近。进一步根据基因组0—3、221、251、284、302这8个位点的碱基变异,将17种变体分为6种类型：1、nt 0—3（GGTA）+ nt 41—46（TAAAAT）+ nt 221（T）+ nt 251（T）+ nt 284（G）+ nt 302（T）;2、nt 0—3（XGGT）+ nt 41—46（AGATAX）+ nt 221（T）+ nt 251（X）+ nt 284（A）+ nt 302（A）;3、nt 0—3（XGGT）+ nt 41—46（AGATAX）+ nt 221（X）+ nt 251（T）+ nt 284（A）+ nt 302（A）;4、nt 0—3（XGGT/GGTA）+ nt 41—46（AGATAX）+ nt 221（T）+ nt 251（T）+ nt 284（A）+ nt 302（A）;5、nt 0—3（GGTA）+ nt 41—46（TAAAAT）+ nt 221（X）+ nt 251（G）+ nt 284（G）+nt 302（T）;6、nt 0—3（GGTA）+ nt 41—46（TAAAAT）+ nt 221（T）+ nt 251（G）+ nt 284（G）+ nt 302（T）。其中X表示缺失。富士品种包含6种变体,以类型4为主（47.5%）;王林品种包含3种变体,以类型5为主（43%）;金冠包含3种变体,以类型4为主（60%）;斗南品种只有1种变体,为类型5,占比100%;中秋王品种只有1种变体,为类型4,占比100%;信侬红包含2种变体,以类型1为主（83.3%）;信侬黄包含3种变体,以类型1为主（62.5%）。【结论】根据ASSVd nt 0—3、221、251、284、302这8个位点的碱基变异,将富士、斗南、王林、中秋王、金冠、信侬红、信侬黄品种中17种变体分为6种类型,不同苹果品种携带的ASSVd种群结构、病毒变体类型及占比均不同。     

河北苹果坏死花叶病毒的发生及近全基因组序列的测定与分析

为明确苹果坏死花叶病毒（Apple necrotic mosaic virus, ApNMV）在河北的发生及其基因组特性，本试验利用RT-PCR技术对河北保定两地ApNMV发病情况进行检测，然后通过高通量测序技术对带毒样本进行序列测定和分析。结果表明，河北农大果园‘红珍珠’‘锦锈红’‘信侬红’3个品种及保定唐县苹果实验基地富士品种ApNMV检出率分别为9.09%、18.18%、100%和65%。ApNMV阳性果树高通量测序结果显示，果树为ApNMV、苹果褪绿叶斑病毒（Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV）、苹果茎沟病毒（Apple stem grooving virus, ASGV）和苹果茎痘病毒（Apple stem pitting virus, ASPV）复合侵染，ApNMV河北分离物（ApNMV-HB）的近全基因组序列包含RNA1～RNA3序列，GenBank登录号分别为OP019626、OP019627和OP019628。RNA1编码120 kD的甲基转移酶/NTP-binding解旋酶（MET/HEL）,RNA2编码97 kD的RNA聚...