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为了快速检测转 Cp4 epsps 基因大豆, 本研究以纯化后的CP4-EPSPS单克隆抗体1D12为捕获抗体, 辣根过氧化物酶标记的羊抗CP4-EPSPS多克隆抗体8092为检测抗体, 通过优化抗体工作浓度和抗原抗体反应时间, 成功建立转 Cp4 epsps 基因大豆快速双抗夹心ELISA检测方法?结果显示:最佳检测条件为捕获抗体浓度10 μg/mL, 检测抗体浓度1.25 μg/mL, 样品与检测抗体先后加入酶标板37℃共同孵育60 min?该方法的检测范围为0.312 5~80 μg/mL, 待检叶片?籽粒最佳检测范围为10~80倍稀释; 板内变异系数为1.64%~5.42%, 板间变异系数为3.05%~9.13%, 符合ELISA定性试剂盒参考标准; 对100份大豆叶片?20份大豆籽粒进行检测, 与Western blot结果和标准结果进行比较, 符合率为100%, 表明该检测方法具有良好的准确性和重复性?该检测方法75 min内即可完成检测, 适用于快速检测转 Cp4 epsps 基因大豆, 为转 Cp4 epsps 基因快速检测试剂盒的开发奠定了基础? 相似文献
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