中国部分板栗品种的SSR标记

从板栗(Castanea mollissima)燕红中分离到25个SSR标记。为了鉴定这些SSR位点,在重复序列的两侧侧翼序列设计引物,并通过化学荧光检测法对6个板栗样品进行检测,共检测到20个多态性位点,每个位点的等位基因数为2~6个。挑选12个位点,通过半自动系统ABI PRISM377对中国北方24个板栗品种进行分析,这12个标记显示了高达75个等位基因的遗传多态性,每个位点的等位基因为4~10个,平均为6.3个,预期的平均杂合性为0.743(介于0.680~0.845),观察值为0.829(介于0.730~0.930)。无效等位基因估算频率显示为3个位点的正向价值,除了一个位点外,这些价值都很低,鉴定几率为7.01×10-11,亲缘关系鉴定几率非常高,为0.999,足够用于花粉流的研究。     

DNA分子标记技术在西瓜遗传相关研究中的应用

综述了分子标记技术在西瓜种质遗传多样性与亲缘关系研究，遗传图谱的构建，目标性状的连锁分子标记与分子标记辅助育种，品种及杂交种的纯度鉴定等方面的应用进展。     

柿树根际嗜铁细菌地衣芽孢杆菌CAS20的分离鉴定

采用CAS检测平板法,从柿树根际土壤中分离获得一株具有较强产嗜铁素能力的细菌菌株CAS20。根据菌株在LB固体培养基上的培养特征和生理生化特性,将其初步鉴定为芽孢杆菌(Bacillus);经16S rDNA序列分析,CAS20的16S rDNA基因序列(KY199559)与地衣芽孢杆菌(Bacillus.licheniformis)代表菌株ATCC14580的16S rDNA序列(NR_074923)具有99.93%的相似性,并且位于系统进化树的同一分枝。据此,将菌株CAS20鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。     

16种杀菌剂对柿树炭疽病菌哈锐炭疽菌的抑制效果

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了16种常用杀菌剂对柿树炭疽病菌哈锐炭疽菌(Colletotrichum horii)菌丝生长及孢子萌发的影响。结果显示,16种常用杀菌剂中,10%苯醚甲环唑散粒剂、33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂、430 g·L~(-1)戊唑醇悬浮剂、50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂、400 g·L~(-1)氟硅唑乳油、250 g·L~(-1)己唑醇悬浮剂、70%代森联水分散粒剂、22%多菌灵+8%戊唑醇(福连)和50%福美双可湿性粉剂等11种杀菌剂对菌丝生长抑制效果较好,抑制率为95.63%~100%;70%代森联水分散粒剂、33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂、50%氯溴异氰尿酸水溶性粉剂、50%福美双可湿性粉剂和400 g·L~(-1)氟硅唑乳油等7种药剂处理对病原菌分生孢子抑制效果较好,分生孢子萌发率为0~3.33%。其中,33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂和400g·L~(-1)氟硅唑乳油对柿树炭疽病菌菌丝生长和产孢的抑制效果均较好,可作为防治柿树炭疽病的优选药剂,其次为70%代森联水分散粒剂和50%福美双可湿性粉剂,可作为备选药剂。该研究结果可为柿树炭疽病的有效防治提供科学依据和试验数据。     

洋葱伯克霍尔德式菌CAS19产嗜铁素条件的研究

采用光谱吸收法,对一株分离自土壤的嗜铁细菌洋葱伯克霍尔德式菌Burkholderia cepacia CAS19产嗜铁素的条件进行研究。结果表明,MSA培养基最适于CAS19产嗜铁素,并且在320nm处有一个嗜铁素特异吸收峰;当铁离子浓度大于1μmol/L时,几乎完全抑制CAS19嗜铁素的产生;CAS19产嗜铁素的最适条件为:以蔗糖(sucrose)为C源,以脯氨酸(Pro)为N源,C/N比为10∶1,pH值为7.5,温度为30℃,通气量为20mL/250mL。     

苹果NAD–苹果酸酶基因的克隆及在不同组织和果实发育阶段的表达分析

 NAD-malic enzyme（NAD-ME）是植物调控苹果酸代谢中的关键酶。以富士苹果（Malus × domestica Borkh.）叶片为试材,通过同源比对和RT-PCR 技术,克隆获得2 个NAD–苹果酸酶基因 （MdNAD-ME1 和MdNAD-ME2）。其ORF 分别为1 785 bp 和1 818 bp,推测其分别编码595 和605 个氨 基酸的多肽。氨基酸序列和结构分析显示,含有5 个保守的氨基酸区域（Ⅰ~Ⅴ）,包含2 个功能结构域： malic 和NAD_bind_1_malic_enz。进化树分析结果显示,MdNAD-ME1 属于α 组双子叶亚组,MdNAD-ME2 属于β 组双子叶亚组。荧光实时定量结果显示,MdNAD-ME 在被检测的组织中呈组成型表达,且在多种 组织中MdNAD-ME1 表达量高于MdNAD-ME2。在富士苹果果实不同发育阶段,MdNAD-ME1 与MdNAD-ME2 具有不同的表达模式。以上结果表明,克隆得到的MdNAD-ME1 和MdNAD-ME2 属于植物NAD-ME,在 苹果的生长和发育过程中MdNAD-ME1 和MdNAD-ME2 可能起到不同作用。     

水稻CO39β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆

以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料，提取水稻基因组DNA，通过PCR扩增获得水稻β-1，3-葡聚糖酶基因（CO39-β-1，3-Glu），经序列测定得知该基因大小为489bp，通过Blastn搜索确定该片段位于水稻10号染色体。序列比对结果表明，CO39-β-1，3-Gill与己知的水稻Gns7和大豆Glycinesoja clone Gs522194a endo-β-1，3-glucanasegene，Glycine soja clone Gs464889-Bendo—β-1，3-glucanase gene三个基因的相似性分别为51．5％，47．2％和49．1％。CO39-β-1，3-Giu基因是β-1，3-葡聚糖酶基因家族的一个成员。     

玉妃桃初代培养的研究

以玉妃桃当年生枝的顶芽和腋芽茎段为外植体,研究在70%和75%的酒精作用下,不同节间茎段的污染率和诱导率,以及不同激素配比下的诱导率和生长情况。结果表明,顶芽茎段的表面消毒以70%酒精为宜,而腋芽茎段的表面消毒以75%酒精为宜,且茎段选取应以1个节间为佳;适合顶芽茎段的初代培养基组合为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+IBA 0.3 mg·L-1,适合腋芽茎段的初代培养基组合为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+IBA1 mg·L-1+LH 300 mg·L-1。     

毒死蜱降解细菌WJl-063的鉴定及酶促降解特性

从海南某农药厂地土壤中分离到1株能很好降解毒死蜱的菌株WJI-063,经形态特征、生理生化及16s rDNA序列分析,将该菌株初步鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).降解酶降解性能研究表明,该菌株能以毒死蜱作为唯一碳源生长,并且对毒死蜱起主要降解作用的是胞内酶,其传代降解代谢活性稳定.以牛血清白蛋白为标准蛋白,测得粗提酶中可溶性蛋白含量为0.044 mg/mL;在pH5.0～8.0范围内,酶活力表现稳定,通过双曲线法认为该酶降解毒死蜱的最适pH值为8.0;毒死蜱降解酶热稳定性差,最适温度为25℃;该酶与毒死蜱底物结合力强,对毒死蜱具有较好的降解效果,米氏常数Km为201.92nmol/L,最大降解速率为399.36nmol/mg·min.     

土壤嗜铁细菌C19的筛选、分子鉴定及其对炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用

利用LB液体培养基进行生物富集,采用CAS(Chrome Azurol S)检测平板法.从海南岛橡胶树等作物根际土壤中分离获得43个产嗜铁索细菌菌株.通过室内平板对峙培养法研究其中嗜铁能力较强的菌株C19对12个常见炭疽菌和镰刀菌的拮抗作用,结果表明.该菌株对Fusarium solani等9个菌株有不同程度的拮抗作用,显示该菌株具有较好的生防潜能.扩增菌株C19的16S rDNA序列,序列测定结果显示,该片段长度为1 525 bp,经Blastn搜索进行序列比对.该细菌为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia).