《种苗学》课程研究性教学改革探索

为进一步提高“种苗学”课程的教学效果,对初步构建的研究性教学模式,从教学内容体系、教学模式和考核方法等方面进行了调整,同时提出了课程研究性教学实施过程的改革和促进措施.     

光肩星天牛雌虫产卵分泌物与生殖器官内容物组分的比较研究

为了对光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)雌虫产卵分泌物与生殖系统内各生殖器官内容物鲜重及组分进行分析比较。通过室内饲养产卵期光肩星天牛成虫采集其产卵分泌物及其生殖系统内生殖器官内容物,利用Bradford法、蒽酮比色法、茚三酮试剂显色法对其组分中蛋白质、可溶性糖、游离氨基酸的含量分析测定。结果表明：产卵分泌物鲜重与卵巢内容物鲜重差异显著,而与交配囊、受精囊腺体及侧输卵管萼内容物鲜重差异不显著。卵巢和交配囊内容物中蛋白质、可溶性糖及游离氨基酸的含量均显著高于产卵分泌物中蛋白质和可溶性糖的含量;侧输卵管萼内容物中蛋白质含量显著低于产卵分泌物中蛋白质含量、可溶性糖及游离氨基酸含量均与产卵分泌物中含量差异不明显;受精囊腺内容物中蛋白质、可溶性糖及游离氨基酸含量与产卵分泌物中含量差异不显著,其组分与产卵分泌物中组分基本一致。光肩星天牛雌虫受精囊腺为其产卵分泌物的贮藏器官。     

棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶家族基因特性研究

本研究旨对棘孢木霉基因组20个天冬氨酸蛋白酶家族基因（Asp）特性进行分析。分别进行了进行了保守区及家族预测、氨基酸多序列比较及功能区预测、进化关系分析及其在不同培养条件下棘孢木霉中的差异表达分析。20个Asp均属Asp蛋白酶家族(PF00026),均为酸性(PI<7)。有18个Asps含有信号肽。多序列比对发现Asps含有两个特征性催化指纹“DTGS/A”和“DT/SGS/Y/T/A/N”,根据第二个“DTGT”、“DSGT”、“DTGA/N”和“DSGY/T/S”特征性催化指纹,将20个Asps分为4个分支。进一步在C-hungry胁迫下,10个Asps基因上调,Asp54.2上调最高为3222。在N-hungry胁迫下,8个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为33100。山新杨（Tas-PdPap）叶粉诱导后,13个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为21078。说明棘孢木霉促杨树生长及与病原菌拮抗过程中,Asp起了非常重要的作用     

转基因白桦抗性等级划分及其对幼虫中肠的影响

利用39个转基因白桦无性系和对照值株分别对舞毒蛾幼虫进行了抗虫性测定,结果死亡率75％上的高抗无性系占15．38％,死亡率在41％～75％的中抗无性系占46．15％,死亡率15％～40％的低抗无性系20．51％,死亡率15％以下的无性系占17．95％。通过转基因白桦叶片饲喂舞毒蛾幼虫,取食90h后中肠受到坏,取食量开始明显减少;144h取食量后受到严重影响,中肠内食物与对照相比明显减少,证明转基因白桦叶片的毒素可以影响和破坏舞毒蛾幼虫中肠,降低其取食量,从而达到抑制害虫保护林木的目的。     

转基因白桦对舞毒蛾的抗性研究

白桦(Betula platyphylla)是我国北方的乡土树种,主要分布在东北、华北、西北.由于白桦材质优良、材色洁白、表面光滑,是人造板材的优质原材料,在林业生产上具有重要经济价值.但在白桦天然次生林和人工林培育中常常遭受各种害虫的危害,降低了其材积生长和木材质量,影响木材的利用率,给林业经济造成巨大损失.以往对白桦害虫的控制措施多采用化学防治手段,不仅造成环境污染、杀伤天敌、破坏生物多样性和生态平衡,同时导致害虫产生抗药性和防治效果下降.利用基因工程的方法,将杀虫基因导入白桦,使其获得持久、稳定的抗虫性能,是害虫生物防治的新途径之一(Katia et al.,1993;张锐等,2001;程业明等,2001;金风,2004).本文以作者转化的抗虫基因白桦为材料(王志英等,2005),对舞毒蛾幼虫生长发育的影响和抗虫性进行了测定,目的是为抗虫白桦苗木定向培育奠定科学基础.     

棘孢木霉T4小分子疏水蛋白基因hyb2克隆及序列分析

为了深入研究生物防治菌棘孢木霉T4菌株小分子疏水蛋白hyb2的功能,基于已知小分子疏水蛋白基因hyb2部分cDNA序列设计引物,分别以棘孢木霉T4菌株菌丝体总mRNA和基因组DNA为模板,进行PCR扩增,克隆获得hyb2的全长cDNA和DNA序列,其GenBank接受号分别为JX014433和JX185070,cDNA序列编码区长度为321 bp,编码106个氨基酸。BlastP相似性分析表明该基因与深绿木霉的Tahyd5a (ABS59366)基因同源性最高为87%,SignalP信号肽分析表明N端第16和17个氨基酸中间有一个信号肽剪切位点(AFA||AP)。Pfam蛋白家族分析表明它属于hydrophobin_2 superfamily家族。将棘孢木霉T4菌株小分子疏水蛋白基因hyb2对深绿木霉ATCC74058基因组和绿色木霉Gv29-8基因组进行同源性搜索,在2个近缘种的基因组上分别获得9个和8个同源序列。其中,深绿木霉ATCC74058的hyb-a-7和绿色木霉Gv29-8的hyb-v-5疏水蛋白与棘孢木霉Hyb2相似性最高分别为87%和70%,2个序列分别位于深绿木霉ATCC74058染色体骨架5和绿色木霉Gv29-8染色体骨架22上。     

论大兴安岭地区平榛播种育苗的技术

对大兴安岭地区平榛播种育苗技术的阐述,对育苗地选择与整地、种子收集、种子处理、出苗后管理、苗木出圃与贮藏等环节的操作进行了详细说明,并根据工作实践提出了在该地区育苗的注意事项。     

稠李根围木霉的分离及鉴定

以黑龙江省农业科学院园艺分院稠李树(Prunus padus L.)的根围土壤为试验材料,采用孟加拉红平板分离法及GamsBissett(1998)形态分类系统与Kullnig-Gradinger等(2002)的分子分类观点的鉴定方法,研究了稠李树(Prunus padus L.)的根围土壤中木霉(Trichoderma)的种类、数量及多样性状况,以期发现其根围土壤中的优势木霉菌。结果表明:共分离得到哈茨木霉(T.harzianum)25株,说明稠李根围木霉菌丰富但是种类单一,该研究结果为"稠李专用木霉菌肥"的制备提供菌种资源。     

1株木霉的分离鉴定及抑菌和植物促生作用

为获得生防木霉,用稀释平板法从益母草(Leonurus japonicus)根际土中分离到木霉Lj,经形态及分子鉴定,确定Lj为毛簇木霉(Trichoderma velutinum)。平板对峙培养时,Lj对杨叶枯病菌(Alternaria alternata)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、杨树烂皮病菌(Cytospora chrysosperma)菌丝生长抑制率为28.4%~60.9%。将Lj固体发酵所产孢子稀释灌土后播种小白菜(Brassica chinensis),孢子浓度为0、109、108、107、106个·mL~(-1),检测时间为播种后15、30、45 d。相比同一时间点对照,处理组叶绿素质量分数明显较高,并随Lj孢子浓度下降而增加,最大值出现在106个·mL~(-1)组。处理组小白菜根长、叶长、鲜质量在15 d和30 d显著高于对照。叶过氧化物酶活性在15d时与对照无显著差异,30 d和45 d时大部分处理组显著高于对照,分别在109、106个·mL~(-1)组最高。Lj菌株具有拮抗真菌和促进小白菜生长的生防功能。     

转基因单倍体小黑杨对天幕毛虫的抗性分析

以转基因单倍体小黑杨对天幕毛虫幼虫抗性进行研究,结果表明:该转基因小黑杨可延缓天幕毛虫幼虫发育,与对照相比转基因株系TT1和TT3分别使1～3龄的幼虫发育延缓1.24d和2.92d;取食TT18～19d的幼虫平均体质量与对照相比下降1.42%～17.37%、取食TT38～19d幼虫平均体质量下降10.77%～24.80%;取食TT14～18d的幼虫校正死亡率为9.52%～49.32%、取食TT34～18d的幼虫校正死亡率为11.11%～52.70%;取食转基因植株TT1幼虫的蜕皮指数2.969～3.769、毒力为0.010～0.026,取食转基因植株TT3幼虫的蜕皮指数2.906～3.714、毒力为0.032～0.041。