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大丽轮枝菌致病性相关突变体快速筛选体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】建立适合于大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)致病性相关突变体的快速筛选体系,为突变库中与致病性相关突变体的系统筛选和鉴定提供技术支撑。【方法】棉花幼苗接种于5.0×104、5.0×105、5.0×106、5.0×107和5.0×108孢子/mL的孢子悬浮液30 min,通过病情指数调查明确引起棉花黄萎病发生的病原菌浓度范围;对培养于培养瓶的大丽轮枝菌分别加入15、25、35和45 mL的灭菌水,利用血球计数板检测洗脱的孢子浓度,明确不同体积灭菌水对洗脱孢子悬浮液浓度的影响;以保存于96孔板的突变体为单位,在培养皿上进行单孢分离并挑取单个孢子于培养瓶中扩繁培养,培养后于培养瓶中直接加入适宜体积灭菌水洗脱孢子,并将棉花幼苗直接置于含有孢子悬浮液的培养瓶中处理30 min,接种后继续培养14 d并调查结果;致病性相关突变体的可靠性检验采用定量菌液蘸根接种法,每个突变体接种30株棉花幼苗,3个重复,孢子浓度为5.0×106孢子/mL,每株棉花幼苗按接种5 mL菌液计算,处理30 min,分别在第5、8、11和14天调查病情指数。【结果】明确了适合于大丽轮枝菌致病力快速鉴定的接种孢子浓度为>5.0×105孢子/mL;建立了大丽轮枝菌培养方法,单孢纯化培养5 d,培养瓶中扩大培养9 d,确定了快速定量制备孢子悬浮液的洗脱体积为25 mL,测试的20个突变体的洗脱孢子浓度范围在(2.55±0.58)×106-(1.72±0.25)×107孢子/mL;优化了单孢分离、扩大培养、孢子悬浮液制备、接种、继续培养和结果统计等环节,建立了大丽轮枝菌致病性快速鉴定流程,进一步统筹设计构建了大丽轮枝菌致病性相关突变体快速筛选体系;测试表明该体系1人1个循环共7个流程可完成1 344个突变体筛选,周期54 d,工作量为21人日;采用定量菌液蘸根法重复验证结果,突变体致病力同样显著下降,与快速筛选体系的鉴定结果一致,表明该体系适用于大丽轮枝菌致病性相关突变体的快速筛选。【结论】通过棉花幼苗种植、突变体单孢分离、扩繁培养、孢子悬浮液制备、接种、结果统计等环节的优化和标准化,构建了适合于大丽轮枝菌致病性相关突变体的快速筛选体系,为后续致病相关基因的分离提供了技术支撑。 相似文献
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通过对虚拟图书馆的内涵解读,阐述了虚拟图书馆的属性特征,提出了虚拟图书馆建设的内容和对策,目的是为了促进虚拟图书馆向着又好又快的方向发展. 相似文献
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王新艳 《农业图书情报学刊》2006,18(5):104-106
书刊的损毁、丢失问题是目前高校图书馆面临的普遍现象,并有蔓延之趋势。文章就这个问题进行了透视和剖析。深刻揭示了该现象产生的原因,并提出了遏制对策。 相似文献
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阐述了信息化农业与农产品营销信息化间的关系,明确了农产品营销信息化是信息农业发展的基础和突破口。 相似文献
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互联网技术下农产品的网络营销 总被引:6,自引:0,他引:6
随着互联网技术的高速发展,网络市场被众多农产品销售商看好,网络营销已经成为农产品营销的重要途径.文章在解读了网络营销的内涵和优势的基础上,分析了"三农"在农产品网络营销中的先天不足,确定了农产品网络营销的主体定位和客体定位,并提出了农产品网络营销的相应对策. 相似文献
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发展现代农业,建设新农村,离不开农业科技资源尽快转化为现实生产力.文章分析了农业科技资源的开发利用在农业可持续发展中所处的地位,提出了农业科技资源开发利用的路径和思路,举例说明了区域高校农业科技资源开发利用对加快沂蒙经济建设步伐,促进沂蒙山区新农村建设的作用. 相似文献
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