苹果和梨AFS基因启动子的克隆、序列比对及功能分析

苹果（Malus × domestica L.）和梨（Pyrus communis L.）果实在低温储存过程中虎皮病的发生与果皮中受乙烯诱导的α–法尼烯合酶基因（AFS）的表达及α–法尼烯的积累密切相关。采用TAIL-PCR技术分别从‘富士’苹果和‘丰产’梨中克隆到了约2 kb的α–法尼烯合酶基因（AFS）启动子序列,并提交至GenBank中（登录号分别为KM676083和KM676082）。序列比对发现两启动子同源性仅为48.31%,远低于其下游编码区97%的相似度。顺式作用元件在线预测分析发现二者同时存在乙烯、脱落酸、茉莉酸、水杨酸等激素响应元件,低温、厌氧、病原菌等胁迫响应元件,以及3个节律性表达元件和2个诱导子响应元件。对‘丰产’梨中AFS基因表达模式的分析也证实了部分预测的诱导因素对其表达有调控作用。将‘丰产’梨AFS基因启动子序列进行系列删除,与GUS报告基因构建融合表达载体转化烟草,利用GUS染色方法分析了不同长度启动子的转录活性差异,发现缩短至153 bp的启动子片段仍具有较强的转录活性,且长度在276 bp至573 bp的启动子片段其驱动下游基因转录的活性较其他片段更强。通过后续对各作用元件尤其是乙烯响应元件的研究将有助于进一步从分子水平认识虎皮病的发生机制。     

藜麦淀粉微球的制备及性能表征

淀粉微球广泛应用于化妆品、食品及医药领域，已成为近年的研究热点之一。采用反相乳液聚合法（IEP）制备藜麦淀粉微球，通过单因素及正交试验优化淀粉微球制备工艺，以期得到吸附性能良好的藜麦淀粉微球。进一步采用扫描电镜（SEM）、显微数码测量分析仪及热重分析仪（TG）对藜麦淀粉微球进行性能表征。结果表明：最佳制备工艺为淀粉质量分数9%，大豆油相用量100 mL/120mL，交联剂环氧氯丙烷1 mL/120mL，搅拌速度400 r/min，乳化剂用量3 mg/mL，反应时间3 h，此条件下藜麦淀粉微球亚甲基蓝吸附量为0.828 mg/g。性能表征结果表明，藜麦淀粉微球粒径分布均匀，平均粒径为28.5μm，藜麦淀粉微球表面分布大量较小的孔洞。     

藜麦淀粉提取工艺优化及性质表征

藜麦淀粉占藜麦种子的50%～60%,具有支链含量高、酶敏感性强的特点，应用潜力大。为研究藜麦淀粉的提取工艺，以白藜麦为原料，采用单因素及响应面法研究料液比、pH、提取温度及提取时间等因素对藜麦淀粉提取率的影响，建立藜麦淀粉的最佳提取工艺，进而对藜麦淀粉性质进行表征。结果表明：碱法提取藜麦淀粉的最佳工艺为0.3%NaOH,料液比1∶5,提取温度30℃,提取时间3 h。在此条件下，淀粉提取率为65.43%。形貌及结构分析表明：藜麦淀粉为多边形，颗粒形状均匀，颗粒粒径较小，在1～3μm,属于小颗粒淀粉；温度同样会显著影响藜麦淀粉的溶解度和膨胀度，随着时间延长，凝沉性增加；反复冻融后析水率增大，藜麦淀粉冻融稳定性优于玉米淀粉、小麦淀粉。