禽苗中外源性鸡白血病病毒检测方法的研究Ⅱ．免疫酶细胞片检测法与补体结合试验法的比较

试验比较了检测禽苗中外源性鸡白血病病毒的两种方法，即比较免疫酶细胞片染色法和补体结合试验（ＣＯＦＡＬ）的敏感性。前者可在接毒９６小时内检出１０~（－２）－１０~（－７）的所有感染鸡白血病病毒的细胞，即出现胞浆被染成棕黄色的阳性细胞，而ＣＯＦＡＬ试验只有１０~（－２）呈阳性，其它均为阴性。ＣＯＦＡＬ试验至少需要２天才有结果，而细胞片染色法只需２小时。     

禽苗中外源性鸡白血病病毒检测方法的研究：Ⅱ.免疫酶细胞片检测法…

试验比较了检测禽苗中外源性鸡白血病病毒的两种方法，即比较免疫酶细胞片染色法和补体结合试验的敏感性。前者可在接毒９６小时内检出１０＾－２－１０＾－７的所有感染鸡白血病毒的细胞，即出现胞浆被染成棕黄色的阳性细胞，而ＣＯＦＡＬ试验只有１０＾－２呈性阳性，其它均为阴性。ＣＯＦＡＬ试验至少需要２天才有结果，而细胞片染色法只需２小时。     

应用酶标记抗体诊断猪瘟的初步报告

前言免疫酶技术是用来测定免疫反应中抗原或抗体的一种先进方法。它的快速性和灵敏性不亚于免疫萤光抗体技术。因此,在医学和兽医学中已广泛应用。     

禽苗中外源性鸡白血病病毒检测方法的研究：Ⅰ.免疫酶细胞片检测法…

已建立用直接或间接酶标组化法检测鸡蛋或鸡胚中污染的白血病／肉瘤病毒，该方法是鸡胚是将白血病／肉瘤病毒的代表毒株接种到已培养好的鸡胚单层成纤维细胞片上，继续培养一定时间，随后将固定好的细胞与特异性酶标抗体反应，经底物显色，镜检，接种肉瘤病毒的细胞片在接毒６小时后就能检出少量的阳性细胞，接毒４８小时的细胞片中的阳性细胞则更为清楚，典型。将病毒液稀释至１０＾－７时接种，其接毒细胞片在９６小时时也能检测到     

三种鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫效力的比较研究

试验用3种不同亚型的鸡传染性法氏囊病（IBD）疫苗毒株制备单价、双价及三价活疫苗。将3种苗分别免疫10－14日龄的SPF鸡，于免疫后1－4周内用法氏囊标准强毒株攻击；攻毒后第3d、14d观察法氏囊病理变化并测定法氏囊重／体重比值；同时检测免疫鸡血清中和抗体水平。试验结果表明，双价及三价活疫苗有明显高的攻毒保护率；血清中和抗体产生早，抗体水平高。     

禽苗中外源性鸡白血病病毒检测方法的研究Ⅰ、免疫酶细胞片检测法的建立

已建立用直接或间接酶标组化法检测鸡蛋或鸡胚中污染的白血病／肉瘤病毒。该方法是将白血病／肉瘤病毒的代表毒株接种到已培养好的鸡胚单层成纤维细胞片上。继续培养一定时间，随后将固定好的细胞与特异性酶标抗体反应，经底物显色后，镜检。接种肉瘤病毒的细胞片在接毒６小时后就能检出少量的阳性细胞，接毒４８小时的细胞片中的阳性细胞则更为清楚，典型。将病毒液稀释至１０~（－７）时接种，其接毒细胞片在９６小时也能检测到典型的阳性细胞；同时，该方法也能检测Ａ、Ｂ两个亚群的另外四个毒株（ＲＡＶ－１、ＲＡＶ－２、ＲＳＶ－１、ＲＳＶ－２），而对禽的其它病原病毒则呈阴性反应。     

CTB-CPA融合基因构建、表达及其产物的免疫原性

构建成含有编码霍乱毒素B亚单位 (CTB)和产气荚膜梭菌α毒素 (CPA)第 70～ 370位氨基酸的融合基因CTB CPA ,并在大肠杆菌中获得表达。经限制性内切酶鉴定和核苷酸序列分析表明 ,CPA基因在重组质粒中与CTB基因的连接向位是正确的 ,位于CTB基因的下游并与CTB基因处于同一阅读框架。重组菌株BL2 1(DE3) (pECTB CPA)经IPTG诱导后 ,其表达产物经SDS PAGE和Western blot检测表明 ,重组菌株可以表达CTB CPA融合蛋白。表达的产物以包涵体的形式存在 ,可分别被抗CT和A型产气荚膜梭菌抗毒素识别 ,表达量占菌体总蛋白的 2 2 7%。用表达产物免疫小鼠后 ,所产生的对A型产气荚膜梭菌毒素攻击的免疫保护力高于用单独的A型产气荚膜梭菌类毒素免疫的小鼠所产生的免疫力 ,证明所表达的融合蛋白中CTB起到免疫佐剂的作用 ,增强CPA的免疫原性     

温和性猪瘟的病性研究

通过流行病学调查、人工心染实验证实我省一些地区有温和性猪瘟存在。并经酶标抗体、荧光抗体、交互免疫、中和保护等检查和病原特性鉴定,确认温和性猪瘟病毒与石门系强毒为同一血清型.     

霍乱毒素B亚单位基因的克隆及其核苷酸序列分析

利用 PCR技术从含有霍乱毒素 B亚单位 ( CTB)基因的质粒 p UCT1中扩增出不包括信号肽的 3 0 9bp的 CTB全基因 ,并通过点突变技术消除了 CTB阅读框内的终止密码子 ( TAA→GAA) ,以便于在 CTB基因的下游融合其他的外源基因。用限制性内切酶 Bam H 和 Eco R 对 PCR产物进行双酶切 ,以 T4DNA连接酶将其定向连接于经同样酶切处理的质粒 p ET-2 8b( )的多克隆位点上 ,构建成重组质粒 p ECTB,转化至BL2 1 ( DE3 )中。经 Bam H 和 Eco R 双酶切分析和 PCR扩增检测 ,证明重组质粒 p ECTB中含有 CTB基因。核苷酸序列分析表明 ,克隆的 CTB基因在重组质粒中的连接向位和阅读框架是正确的