利用单根肌纤维法分离和培养猪骨骼肌卫星细胞及其成肌诱导分化

建立单根肌纤维法体外培养猪骨骼肌卫星细胞的体系,了解其增殖和成肌特性。通过Ⅰ型胶原酶消化,从猪骨骼肌中分离完整的单根肌纤维并培养,用细胞免疫荧光鉴定肌纤维上的卫星细胞,随后对从单根肌纤维上游离出来的卫星细胞进行细胞免疫荧光染色,传代培养,成肌诱导分化和Western blot分析骨骼肌卫星细胞成肌特异性蛋白的表达。结果显示:分离并培养的单根肌纤维上附着有卵圆形的细胞,并随时间的推移,细胞缓慢向外迁移并增殖,卫星细胞特异性标志基因对盒转录因子(Paired protein box,Pax7)和成肌分化抗原(Myogenic Differentiation Antigen,MyoD)免疫荧光染色呈阳性,且阳性率达到90%以上。成肌诱导分化后,细胞开始汇合,并呈方向性生长,最终形成多核肌管,且成肌特异性标志基因Myogenin和myosin heavy chain(MyHC)表达呈阳性。MyoD蛋白高表达于增殖期,而Myogenin和MyHC在进入分化期才表达。该实验成功建立了猪骨骼肌单根肌纤维的体外培养方法并获得了高纯度的卫星细胞,为骨骼肌卫星细胞进行活体移植治疗相关疾病研究提供了实验材料。     

温州人就这样"钱生钱"

从炒房到炒煤,温州人的一举一动成了民间投资的风向标. 在调查中,大家对温州人的看法基本相似:读书不多,但对于圈子内的人倍加信任.也许正是这个特点使得他们虽在诸多投资领域知之甚少,却能在某位带头人的引领下,迅速形成合力,把财富席卷囊中.     

落叶松覆膜育苗技术

落叶松为吉林省东部山区主要造林树种之一。利用覆膜方法培育的苗木与常规育苗相比较,平均苗高提高了28.12%,平均地径提高了32.60%,平均侧根数增加了23.53%,平均主根长提高了18.46%,成苗率提高了39.39%,Ⅰ苗成苗率提高了75.43%。     

从畜禽养殖场(户)监管看榆林市病死畜禽无害化处理

按照国家对食品安全的要求,食品安全要从源头监管,作为维护公共卫生安全的各级农业畜牧兽医主管部门及动物卫生监督所承担着养殖场的监管工作。从近年来媒体曝光的公共卫生安全事件来看,随意抛弃、收购、经营、加工、出售病死动物及动物产品案件在有些地方时有发生。病死猪及产品携带病原体,如不进行无害化处理或任意处置,会严重污染环境,危害公共卫生安全。这虽然属于个别情况,也充分暴露出监管手段落后、监管不力的问题,养殖场包联兽医形同虚设。笔者希望本文能给同行带来一些监管启示,供大家参考。     

柠条锦鸡儿、梭梭和砂生槐简介及其饲用价值研究进展

柠条锦鸡儿、梭梭和砂生槐3种植物不仅具有一定的生态价值,而且具有很大的饲用价值,是优良的饲草替代物。介绍了柠条锦鸡儿、梭梭和砂生槐的生物学特性和生态学特征,并对这3种植物的饲用价值研究进展进行了综述,旨在为下一步在西藏阿里地区开展试种试验提供一定的参考。     

试论变电所的常用故障处理

本文从变电所的概念出发，探讨了变电所直流系统接地故障处理及电容器的故障处理等措施。     

鲑鳟类养殖常见疾病及预防

鲑鳟类是世界性的主要冷水养殖鱼类，鱼病的防治在鲑鳟养殖生产中十分重要，尤其是高密度饲养时，更容易发生鱼病。加强鱼病防治，尽量减少鱼病造成的损失，是提高鲑鳟养殖成活率和增加经济效益的重要措施之一。     

新疆双峰驼C3d基因cDNA的克隆与序列分析

【目的】克隆骆驼补体C3d基因,分析序列特征,为其佐剂效应研究提供依据。【方法】利用Trizol试剂,从骆驼肝脏组织提取总RNA,并反转录获得cDNA。设计C3d特异引物,应用PCR技术扩增C3d序列,构建到pMD18-T载体。将重组质粒转入感受态菌株并双酶切鉴定。使用ClustW,DNAstar, Swiss-Model软件对构建的重组C3d基因序列进行同源性比对,建立系统进化树并对其二级和三级结构进行预测和分析。【结果】采用骆驼C3d特异引物,PCR扩增获得大小为909 bp的骆驼补体C3d基因。构建至T载体并转入大肠杆菌,获得阳性转化克隆。克隆的新疆双峰驼C3d序列与骆驼科C3d基因之间的同源性在97%以上,与牛和猪C3d基因同源性为88%,与兔和人的C3d基因同源性为83%。对骆驼C3d蛋白采用Swiss-Model软件进行序列分析,预测该蛋白质的二级结构主要由α-螺旋和β-折叠组成,该蛋白可能具有良好的免疫原性和免疫结合活性。【结论】C3d基因在进化中较为保守,在骆驼免疫中可以采用亲缘关系较近的其他动物来源的C3d作为分子佐剂从而增强骆驼免疫效果。     

猪病治疗无效的原因分析与对策

养猪业一直是我国农村创造经济收入的主要手段之一。近年来,猪的慢性、隐性、温和型疾病不断发生,公猪、母猪、保育猪、育肥猪等均可感染。虽然,养猪业制定了一些疾病预防控制措施,但是效果并不理想,猪病频发和治疗无效时有发生,因此,对猪病治疗无效的原因分析及找到有效防治策略显得尤为重要。为了保证猪的健康生长,养猪场户能提供优质健康的猪肉,笔者根据养猪过程中遇到的一些问题,进行归类与总结,分析猪病治疗无效的原因并提出防御对策,希望能为广大养殖户提供一些可行性建议与参考。     

NaCl胁迫对银柴胡药材活性成分含量及其积累量的影响研究

[目的]研究盐胁迫对银柴胡药材产量和活性成分相对含量及积累量的影响,以明确盐胁迫对银柴胡药材产量和质量的影响效应,为银柴胡的规范化栽培提供理论依据。[方法]盆栽控盐试验栽培柴胡一年生幼苗,土壤盐含量设置为2、3、4 g/kg 3个水平;利用紫外分光光度法测定银柴胡药材中总黄酮和总皂苷的相对含量,并结合产量计算其积累量。[结果]随着土壤中NaCl含量的增加,银柴胡药材产量呈现逐渐下降的趋势;药材中总黄酮和总皂苷相对含量呈现逐渐升高的趋势,而其积累量呈先升高后降低的趋势。[结论]盐胁迫显著提高银柴胡药材产量、总黄酮和总皂苷的含量,当土壤盐含量为3 g/kg时,银柴胡药材总黄酮和总皂苷积累量均较高,有利于银柴胡药材的优质高产栽培。