猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速检测猪瘟(CSF)疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染的方法,试验根据GenBank上登录的BVDV 5'端非编码区基因组序列设计1对引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了检测猪瘟疫苗中BVDV污染的一步法RT-PCR。结果表明:该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV基因组RNA的检测灵敏度达0.1 ng,与细胞培养法的符合率达100%。应用该方法对猪瘟疫苗、牛血清等138份样品进行BVDV污染的检测,阳性污染率达11.59%。该一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于猪瘟疫苗生产中血清、细胞、毒种、半成品等的质量控制及猪瘟疫苗临床应用中的质量检验。     

研究兽用疫苗储运过程的质量控制

当前我国的畜牧业得到了极大的发展,正朝着规模化饲养发展,为了确保饲养动物的质量安全,兽药是不可缺少的,其质量十分重要,不仅关系到动物的安全和质量,还会影响人们食品的健康安全。我国的肉产品主要就是畜禽,动物疫苗上也侧重于禽苗以及猪苗,一般都是传统疫苗。实践证明疫苗在储运中抗原量会降低,因此,在疫苗流通的整个过程中,每个环节的物流都十分重要,本文分析了兽用疫苗储运过程的质量控制。     

兽用生物制品中支原体污染PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速检测兽用生物制品中支原体污染的方法,试验根据GenBank上登录的支原体16S rRNA种属保守区序列设计1对引物,经PCR条件优化,建立了检测兽用生物制品中支原体污染的PCR方法。结果表明:该方法对大肠杆菌、沙门氏杆菌、巴氏杆菌、猪链球菌、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、新城疫病毒的扩增结果均为阴性;对鸡毒支原体、猪肺炎支原体、禽滑液支原体基因组DNA的检测灵敏度分别达到0.13,0.88,0.14 ng,与培养法的符合率达98.84%;应用该方法对鸡胚、血清、细胞等140份临床样品进行支原体污染的检测,阳性污染率达6.43%。表明PCR方法检测具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于兽用生物制品生产中鸡胚、血清、细胞、疫苗半成品等的质量控制和疫苗的质量检验。     

猪鹦鹉热衣原体流产灭活疫苗试生产试验

按照猪鹦鹉热衣原体流产灭活疫苗制造和检验试行规程要求,在GMP生产车间进行鸡胚的孵化、衣原体的繁殖、衣原体灭活及疫苗乳化,共试生产三批猪鹦鹉热衣原体流产灭活疫苗,每批80万毫升。结果显示这三批疫苗生产中的中间品和成品的标准均符合猪鹦鹉热衣原体流产灭活疫苗制造和检验试行规程。