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[目的]克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70 (HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性.[方法]以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70.构建EgHSP70基因的原核表达载体pET28a-EgHSP70,诱导表达重组蛋白,纯化,免疫鼠,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测血清抗体效价、特异性及抗原在虫体组织中的位置.[结果]从Eg成虫cDNA文库中筛选获得特异性EgHSP70基因,酶切和测序结果均表明该基因已克隆到pET28a.EgHSP70融合蛋白在A600=0.6,0.4 mmol IPTG,37℃表达5h为最佳表达.经His亲和层析法纯化获得了HSP70融合蛋白相对分子质量约为33 kDa.免疫小鼠可产生高滴度(最高1∶640000)特异性抗体.Westernblot分析结果表明,制备的抗血清与EgHSP70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、Eg虫体蛋白和Eg虫体表面蛋白均能特异性结合,其他带科绦虫有此蛋白表达IFA检测结果证实EgHSP70在细粒棘球绦虫成虫体表膜及体表内有表达.[结论]实验得到的EgHSP70融合蛋白具有较好的免疫原性和抗原性,可用于研制包虫病疫苗及相关诊断试剂为包虫病的防控提供技术支持. 相似文献
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是指配种前1．5月至配种开始这段时间。要做好种公羊的体检工作：检查种公羊是否健康,选留体格健壮、腰情好的种公羊备用;检查种公羊的蹄部是否平整,若蹄部不平整进行修蹄,若蹄弱需适当补钙、维生素和微量元素以达到配种要求;检查种公羊是否有寄生虫,若有用0．1％浓度的硫苯咪唑替钠驱虫,按体重每5kg一片;检查种公羊是否有其他疾病;检查种公羊精液品质,每周两次,作好记录,对精液密度差、活力低（0．4以下）的种公羊应加强运动和营养,若经过2周加强后精液品质仍未有提高则要考虑弃用此羊。 相似文献
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