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用犊牛睾丸细胞培养传染性牛鼻气管炎病毒（IBRV），反复冻融，差速离心提取病毒，用Triton X-100溶解，超声波处理，制成IBRV TritonX-100亚单位抗原，经SDS－PAGE电泳，其分子量在176kD-53kD之间，其中有6条清晰的蛋白带。该抗原与一定比例的白油－司盘佐剂乳化，接种育成年，经间接ELISA检测，可使接种的育成牛产生高效价的血清抗体（OD492mm=1.57)。2种不同剂量（80mg/头，40mg／头）的IBRV亚单位疫苗接种育成牛，体内抗体效价相差不显著，抗体可在体内持续12周，用IBRV TrionX-100亚单位疫苗2次接种育成牛，其体内抗体效价显著高于用灭活疫苗2次接种育成牛体内的效价。试验结果表明：提取的IBRV多肽制作的亚单位疫苗具有良好的免疫原性，且抗体持续时间较长。 相似文献
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将密螺旋体菌株(包括猪痢疾密螺旋体和无害螺旋体)接种于华农1或3号血液琼脂平板上,置CO_2:H_2=20:80的环境中和37℃下培养5天。选择生长最好的琼脂平板,每个加入3ml PBS(0.01mol,pH7.2),洗下培养物,集中后加入等容积的S. H. 保护剂并使成均一的悬液分装安瓿瓶。用Edwards EF03型冻干机进行冷冻真空干燥,在真空状态下密封安瓿瓶,冻干菌种保存于4℃冰箱或-10～-15℃冰盒中。保存期:用新鲜保护剂者为8-13个月;用干燥保护剂者为二年。 相似文献
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用单克隆抗体荧光标记技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体程国富，陈毓川，苏雄，徐珊（华中农业大学牧医系武汉４３００７０）猪痢疾（ＳＤ）是生长育肥猪的一种严重的粘膜出血性腹泻病，其病原为猪痢疾密螺旋体（Ｔ·ｈ）。对该病的诊断常依据可疑猪的病史，临床症状和病理... 相似文献
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用根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens,At)酶的粗提取物加入到培养猪痢疾密螺旋体(Treponema hyodysenteriae,Th)的培养基中后接种Th(H_(10)菌株)在CO_2:H_220: 80的环境中,37℃培养5天后,收获并制备Th抗原。这种抗原在微量凝集试验(microtitr-ation agglutination test, MAT)中能防止自凝现象。用这种Th H_(10)抗原检测了92头猪痢疾的血清和6头高免兔血清[其中用5株Th,1株无害螺旋体(Ti)高免)。结果表明Th与Ti高免血清之间有一定的交叉反应,但滴度是有显著区别的。48头SPF猪血清的效价均在64倍以下;而92头猪痢疾痢猪血清的抗体含量在128-2048倍之间,其中仅有一头猪的滴度为64倍,因此该法可用于猪痢疾病猪群的诊断。 相似文献
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猪痢疾密螺旋体病发病率高、流行广、蔓延迅速、常导致养猪业遭受巨大的经济损失。本究研目的在于寻求一种高效抗菌药物,以达预防和治疗的效果。我们用新药痢菌净(3-甲基-2-乙酰基-喹(口恶)啉-1.4-二氧化物),对猪痢疾密螺旋体进行药敏和临床治疗试验,并与痢立清、土霉素、增效磺胺等药物作比较试验,以确定痢菌净在临床上的价值。现将试验经过及其结果报告如下: 痢菌净对猪痢疾密螺旋体药敏试验一、材料与方法1、菌株来源:从典型自然发病的猪血痢症结肠粘膜刮取物分离获得的2-5菌株,经鉴定具有病原性,此菌株经人工感染获得成功。2、培养基:分离猪痢疾密螺旋体的培养基成分①胰蛋白(月示)②胰蛋白胨③(月示)蛋白胨④503型(骨) 胨⑤新鲜牛肉汁⑥多粘菌素B硫酸盐200单位/毫升,⑦琼脂粉⑧5%无菌脱纤黄牛血液。但用于作药敏试验的培养基 相似文献
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以猪痢疾密螺旋体X_(23)株免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,共获得5株分泌抗X_(23)的单克隆抗体杂交瘤,对其中的6H株进行了鉴定:其染色体的平均数为97.5条,培养上清液的间接血凝滴度可达1∶128,玻片凝集滴度可达1∶32;经注入小鼠腹腔后产生的腹水提取抗体免疫荧光染色滴度可达1∶64,间接血凝滴度可达1∶1280。分泌抗体的分子类型为IgG。其针对的抗原成分存在于X_(23)的酚水抽提物的水相脂多糖内,具有型的(或株的)特异性。经长期的体外传代培养和长达7个月的冻存,其分泌抗体的特性保持稳定。 相似文献
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