用表达人溶菌酶基因的重组质粒防治干乳期奶牛乳腺炎

将人溶菌酶（human lysozyme，hLYZ）cDNA插入由pcDNA3改造而成的pcDNAK表达载体。用获得的重组载体pcDNAKLYZ转染COS-1细胞，经免疫荧光试验证明能进行正确表达。将重组载体注射于哺乳母鼠，取其乳汁进行溶菌酶活性测定，结果显示，分泌在乳汁中的重组hLYZ高达139mg／L。根据乳汁体细胞检测结果，选择健康奶牛和乳腺炎阳性奶牛，分别在干奶时和产犊前2周2次注射重组质粒pcDNAKLYZ，注射途径为乳腺基部穿刺，注射剂量为300μg／乳区,于产犊后1个月采集奶样进行体细胞检测，结果显示，对前一泌乳期发生的奶牛乳腺炎的治愈率为91．5％，对下一泌乳期奶牛孔腺炎的预防有效率王少为96．97％。由此认为。构建的表达hLYZ基因的重组表达质粒，可以替代抗菌素类油乳剂用于干乳期乳腺炎的防治。     

家蚕微粒子病PCR快速检测技术研究及诊断试剂盒的研制

根据比对大量微孢子虫ssu rRNA序列的基础上自行设计了检测家蚕微粒子病的通用型引物。本试验确定了PCR反应体系和反应条件,并进行了相关病原检测试验,且对家蚕的不同材料进行了PCR检测,结果表明,本试验建立了有效、特异、敏感的检测家蚕微粒子病的PCR检测方法,为家蚕微粒子病在口岸快速检出,提供了有效的手段。     

致奶牛乳房炎链球菌快速鉴别及耐药试验用选择培养液的培养特性研究

奶牛乳房炎是影响世界奶牛业发展的主要疾病之一，虽然其病原菌有数十种之多，但以金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌为主。标准的链球菌鉴定程序包括增菌培养、血琼脂平板培养、革兰氏染色镜检和生化试验，然后用细菌纯培养进行纸片扩散法药敏试验或最小抑菌浓度（MIC）测定，整个过程不仅需要5d左右的时间，而且需要必要的细菌学试验条件和技术。因此，很多奶牛场在治疗乳房炎前很少进行必要的细菌学鉴定和药敏试验，长期、盲目、超量使用抗生素已导致细菌耐药现象日益普遍。     

致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌快速鉴别及药敏试验选择培养液的培养特性

本研究在Baird-parker培养基基础上,研制出致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(SA)快速鉴别培养及药敏试验用选择mBP培养液.在此培养液中,除SA生长良好外,链球菌等4种革兰氏阳性茵和大肠杆茵等6种革兰氏阴性菌均不生长;将10μL奶样接种入mBP培养液,37℃培养24 h后即可根据培养液是否浑浊和产生黑色产物判断奶样中有无SA,检测灵敏度为60个细菌:经与标准纸片法药敏试验对比证明,mBP培养液对常用于奶牛乳腺炎治疗的7类8种抗生素的抑茵活性无明显影响:将10μL奶样或选择培养物接种入含标准抑茵浓度抗生素的mBP培养液中,35℃培养24 h后即能根据培养液是否浑浊和产生黑色产物判断奶样中SA对所试抗生素的敏感性.以mBP培养液为基础建立的致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球茵快速鏊剐及药敏试验方法具有简单、快速、价廉和不需专门设备等优点,特别适合我国中、小型奶牛场和基层兽医站使用.     

沙门氏菌检测方法研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。作者通过查阅大量文献,对近年来沙门氏菌的检测进展进行了概述。     

奶牛大肠杆菌乳房炎快速鉴别及药敏试验用选择培养液的培养特性研究

由于抗生素的长期和盲目使用，奶牛乳房炎病原菌耐药性问题日益严重。我们以麦康凯培养基为基础，研制出奶牛大肠杆菌乳房炎快速鉴别及药敏试验用MQQ选择培养液。本研究结果显示，在此选择培养液中，除大肠杆菌生长良好外，葡萄球菌、粪链球菌、枯草杆菌等革兰氏阳性菌和沙门氏菌、变形杆菌、多杀性巴氏杆菌、绿脓杆菌、痢疾志贺氏菌等革兰氏阴性菌均不生长；只要接种10μL奶样并于37℃培养24h，即可根据培养液是否浑浊和颜色变化判断奶样中有无大肠杆菌，检测灵敏度为50个细菌；经与标准纸片扩散法药敏试验对比证明，MQQ选择培养液对部分用于奶牛乳房炎治疗的5类8种抗生素的抑菌活性有不同程度的影响，通过调整抗生素使用量可获得与标准方法一致的结果，只要向合适当浓度抗生素的选择培养液中接种10μL奶样并于35℃培养24h，即能根据培养液是否浑浊和颜色变化判断奶样中大肠杆菌对所试抗生素的敏感性，具有简单、快速、价廉和不需专门设备等优点，特别适合我国中、小型奶牛场和基层兽医站使用。     

新城疫病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

根据GenBank中新城疫病毒(NDV)La Sota毒株保守蛋白F蛋白的编码序列,设计2对环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,对甜菜碱浓度、Mg2+浓度、反应温度等LAMP反应体系的最佳反应条件,以及特异性、敏感性等进行研究,建立了一种特异性检测NDV的LAMP方法。结果显示,该方法最低能检测到10个拷贝数的病毒核酸,与其他禽类病毒无交叉反应,且向反应产物中加入SYBR GreenⅠ可直接观察样品是否含有NDV,表明建立的LAMP检测方法具有较强的特异性、较高的敏感性和较好的易操作性,且成本较低,为出入境检验检疫系统进一步搭建NDV快速高通量检测平台奠定基础。     

商品鸡蛋的细菌学检查

母禽的生殖器官虽与泄殖腔直接相邻,但正常情况下蛋液里中并没有微生物。因为它具有复杂的防止感染的自卫机制。但在下列情况下,容易造成蛋的污染:①母禽患病;②产蛋时污染,空气中或附着在蛋壳上的微生物即随空气通过壳上的气孔进入蛋的内部;③环境不干净或储存、运输、销售等环节不卫生,致使蛋壳污染的细菌由蛋壳中的气孔进入蛋内;④蛋壳擦伤、雨淋和水洗、蚊蝇叮咬等。食用了严重污染的禽蛋可能造成人体的疾病,即所谓食源性疾病。本实验对当前市场上的商品鸡蛋的蛋内细菌进行了初步调查,以便探讨有关商品鸡蛋的保存和蛋的污染在食品公共卫…     

德国输华新西兰源牛血清白蛋白的动物疫病传入风险分析

根据风险分析基本原理,通过危害识别、风险评估和风险管理3个阶段,对从德国输入源自新西兰牛的血清白蛋白进行动物疫病传入风险分析。结果显示:19种疫病中无高风险和中风险疫病,其中4种疫病存在"低"风险,9种疫病存在"很低"风险,6种疫病的风险可忽略。结果表明,疫病传入风险较低,结合相关风险管理措施,可将疫病有效控制。本研究为海关总署制定针对性的检验检疫和风险控制措施提供了参考。