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产IMP酶4种病原细菌的检测及其耐药性 总被引:1,自引:0,他引:1
采用16SrRNA和种特异基因的聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)鉴定菌株;用VITEK-AMS 60全自动微生物分析仪测定最小抑菌浓度(minimum inhibition concentration,MIC);PCR测序检测已知的超广谱β-内酰胺酶基因(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)和碳青霉烯酶基因;改良型Carba NP法检测碳青霉烯酶类型。对来自4家医院的6株高水平耐碳青霉烯类抗生素临床分离菌株的检测和耐药性研究。结果显示,6株分别为阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌各1株,肺炎克雷伯菌3株,且均为blaIMP扩增阳性,并携带1个或多个blaTEM、blaCTX-M-1group、blaSHV、blaVIM、blaOXA-1基因。6株菌均产B型碳青霉烯酶,且对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物高水平耐药。结果表明,6株菌对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物多重耐药的主要决定因子是产B型碳青霉烯酶IMP,且和携带ESBLs基因也相关。 相似文献
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克隆羊外膜蛋白Omp25基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对Omp25蛋白的抗原性进行分析.以布鲁氏菌染色体DNA模板,扩增Omp25基因,双酶切后克隆至pET32a上,在大肠杆菌ER2566 (DE3)中诱导表达,组氨酸结合树脂柱纯化,Western blotting鉴定Omp25蛋白的免疫原性.将Omp25克隆至载体pET32a,提取的重组质粒经PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析确定目的基因成功插入到了克隆载体中.将重组质粒转化于大肠杆菌ER2566 (DE3)中表达获得HIS融合蛋白,SDS-PAGE分析证明,表达产物为43 000的融合蛋白.Western blotting分析表明,所表达的蛋白具有免疫原性.结果表明,成功地表达并纯化了Omp25蛋白,而且纯化的蛋白具有一定的免疫原性.本试验为进一步研究Omp25蛋白的功能以及寻找布鲁氏菌的诊断性蛋白奠定了基础. 相似文献
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为探讨酒精阳性乳的发病机理,尤其是患牛的乳腺代谢情况,首次对患牛颈静脉与乳静脉血进行比较。结果表明:与正常牛颈静脉比较,乳静脉血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低,丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量显著升高,总抗氧化能力(T-AOC)降低但差异不显著;与阳性牛颈静脉比较,乳静脉血清中SOD、GSH-Px活性极显著降低,MDA、ROS含量极显著升高,T—AOC极显著下降。综合分析,乳腺组织本身抗氧化能力较差,但机体的保护性代偿能有效维持乳腺分泌细胞的正常分泌;而阳性牛乳腺组织产生了过多的氧自由基,总抗氧化能力下降,抗氧化系统已不能有效地清除活性氧及代谢产物,以至于过多的氧自由基对乳腺上皮分泌细胞细胞膜造成了严重损伤,从而引起乳腺细胞分泌异常乳。 相似文献
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