茶树油对三种常见致病菌的体外抑菌活性研究

为了确定茶树油的体外抑菌敏感度和最低体外抑菌浓度,本试验抑菌剂选择茶树油,供试菌选择沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,进行体外抑菌试验,并测定茶树油原液的抑菌圈以及不同稀释度的茶树油和1.5×108 cfu/ml菌悬液混合培养后在600 nm波长处的光密度值.试验结果表明,茶树油在3种细菌中对金黄色葡萄球菌最为敏感,...     

基于网络药理学研究连翘叶提取物通过AMPK抗恩诺沙星诱导肝损伤的作用

【目的】 运用网络药理学并通过体内试验研究连翘叶提取物（Forsythia suspense leaves extract，FSLE）治疗恩诺沙星（enrofloxacin，ENR）诱导的肝损伤（enrofloxacin induced liver injury，EILI）的作用机制。【方法】 采用乙醇-酶法提取连翘叶有效成分，通过液相-质谱法（LC-MS）鉴定FSLE主要的化学成分。利用PubChem、Swiss ADME和Swiss Target Prediction数据库分析预测FSLE有效活性成分及作用靶点，通过GeneCards疾病数据库搜索EILI的作用靶点。运用STRING在线网站及Cytoscape 3.8.0软件构建FSLE治疗EILI的核心靶点，借助Metascape网站进行GO功能及KEGG通路富集分析，并用Cytoscape 3.8.0软件绘制"成分-靶点-信号通路"可视化网络。通过体内试验验证FSLE抗EILI的药理作用，采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测不同处理组腺苷酸激活蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）的表达，通过商业化试剂盒检测还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）、过氧化氢（hydrogen peroxide，H₂O₂）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性。【结果】 结合LC-MS与各数据库分析得出FSLE活性成分有20种，对应靶点338个；EILI疾病靶点913个；药物-疾病交集靶点124个，包含FSLE治疗EILI核心靶点12个，KEGG通路20条，其中AMPK通路与FSLE治疗EILI密切相关。动物试验结果显示，FSLE可显著降低EILI小鼠血清中谷丙转氨酶（alanine transferase，ALT）和谷草转氨酶（aspartate transferase，AST）活力（P<0.05）。FSLE可显著升高小鼠肝脏AMPK的基因和蛋白表达量水平（P<0.05）。与正常对照组相比，FSLE可显著降低小鼠肝脏组织中MDA和H₂O₂含量（P<0.05），显著升高GSH含量和SOD活力（P<0.05），抑制EILI诱导的肝脏氧化应激。【结论】 FSLE可通过上调AMPK的表达抑制肝脏氧化应激发挥抗EILI的作用，对肝损伤药物的开发具有重要的意义。     

连翘叶酶-醇提取物抗药物性肝损伤作用研究

【目的】研究连翘叶酶 醇提取物（FLEAE）抗药物性肝损伤（DILI）的作用及其机制。【方法】将48只昆明小鼠随机分为6组，每组8只，分别为正常对照组（NC）、FLEAE对照组（FC）、DILI模型组（DILI）及FLEAE高、中、低剂量治疗组（HFC、MFC、LFC），其中NC组和FC组小鼠腹腔注射生理盐水，其余各组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP注射液，每天2次，连续注射4 d，第5天开始NC组和DILI组小鼠灌胃生理盐水，FC、HFC、MFC和LFC组小鼠分别灌胃FLEAE 600，600，400和200 mg/kg，每天2次，连续灌胃3 d。最后1次灌胃12 h后，检测各组小鼠谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平及氧化应激指标谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢（H₂O₂）和丙二醛（MDA）水平，肝组织切片苏木精伊红（HE）染色观察肝损伤情况。用网络药理学方法构建FLEAE调控DILI的靶点集，GO和KEGG分析靶点的基因功能及通路，筛选FLEAE抗DILI的核心靶点。qRT-PCR和Western Blot检测核心靶点PIK3CA及其下游凋亡抑制分子B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）基因和蛋白的表达水平。【结果】FLEAE可显著降低DILI组小鼠血液中的ALT和AST水平，改善药物性肝损伤。FLEAE可显著降低DILI小鼠的GSH和SOD水平，提高H₂O₂和MDA水平。网络药理学分析表明，FLEAE抗DILI靶点与凋亡过程的负调控、氧化应激等有关，主要富集于PI3K/Akt信号通路，可能通过PIK3CA发挥作用；qRT-PCR和Western Blot结果显示，FLEAE可能通过提高PIK3CA基因和蛋白的表达发挥抗DILI及抑制细胞凋亡的作用。【结论】FLEAE通过上调DILI中PIK3CA的表达抑制细胞凋亡和改善氧化应激，发挥抗DILI的作用。