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【目的】 鉴于在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)发病机理和治疗方式上的诸多争议，以及使用人类PCOS材料进行研究的局限性，本研究通过构建PCOS小鼠模型以探究在模型构建过程中性激素水平的变化规律。【方法】 皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA)诱导昆明白雌鼠产生PCOS样临床症状，通过结晶紫染色查看小鼠性周期是否发生停滞；利用HE染色的方式确定卵巢发育状况；利用ELISA技术调查建模过程中血清睾酮和雌二醇浓度的变化规律。【结果】 使用结晶紫对小鼠阴道上皮细胞染色可准确区分小鼠各个性周期阶段；使用6 mg/100 g DHEA持续诱导20 d后，昆明白小鼠性周期循环发生了一定的停滞，且在建模过程中体重变化与芝麻油溶剂的加入呈显著相关(P < 0.05)，与DHEA处理无关；DHEA连续处理后可见卵巢中巨大囊状卵泡出现，血清睾酮水平出现显著升高(P < 0.05)；自PCOS模型构建的第5天起，血清睾酮水平显著上升(P < 0.05)，且维持到建模结束；而血清雌二醇水平出现了阶段性变化，在第10、15天均显著高于对照组(P < 0.05)，第20天时低于对照组。【结论】 改进DHEA溶解方式可成功构建昆明白小鼠PCOS模型，在建模过程中血清睾酮持续处于较高水平，而雌二醇水平呈现先增高后降低的趋势，后者在建模中期瞬时升高的病理意义需进一步研究。 相似文献
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【目的】探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响。【方法】给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光法鉴定促卵泡素受体(FSHR)的表达。当第2代颗粒细胞汇合度达到50%时,先用无血清的DMEM/F12培养基饥饿处理12 h,然后在培养基中添加不同浓度的DHT (0、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L),培养48 h后检测颗粒细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法及ELISA法分别测定AMH基因及蛋白的表达。在颗粒细胞培养液中分别添加10-6 mol/L Flutamide (雄激素受体(AR)特异性抑制剂)、10-7 mol/L DHT、10-7 mol/L DHT+10-6 mol/L Flutamide、10-5 mol/L DHT、10-5mol/L DHT+10-8 mol/L 11-ketodihydrotestosterone (AR特异性激动剂),分别记为F、D7、DF、D5、DK组,以不添加药物为对照组。培养48 h后,检测各组颗粒细胞增殖及AMH蛋白含量。【结果】体外培养的小鼠颗粒细胞呈梭形或铺路石状,生长曲线呈S形,细胞普遍表达FSHR;与0 mol/L DHT组相比,10-8、10-7 mol/L DHT组细胞增殖分别显著和极显著增加(P＜0.05;P＜0.01),10-5 mol/L DHT组细胞增殖显著降低(P＜0.05);10-7 mol/L DHT组AMH基因的相对表达量和AMH蛋白含量均极显著增加(P＜0.01)。与D7组相比,DF组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著降低(P＜0.01);与D5组相比,DK组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著升高(P＜0.01)。【结论】10-7 mol/L DHT能够显著促进颗粒细胞增殖和AMH表达,而10-5 mol/L显著降低了颗粒细胞增殖以及AMH表达,且AR介导了DHT调控颗粒细胞增殖和AMH表达。 相似文献
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