侵染青海辣椒的辣椒隐症病毒2基因组克隆与分析

辣椒隐症病毒2(Pepper cryptic virus 2,PCV2)是近年来发现的辣椒新病毒之一,常与其他病毒复合侵染,影响辣椒的产量和品质。2021年从青海海东市采集疑似病样叶片,采用RT-PCR和基因克隆等方法,获得PCV2青海分离物的两条dsRNA,序列全长分别为1 579、1 435 bp。核苷酸相似性比对发现,PCV2青海分离物两条RNA序列与已报道的其他地区PCV2分离物的序列相似性高于95%,系统进化分析结果显示,PCV2青海分离物的两条RNA均与PCV2分离物Chiltepin 53处于独立的分支,结果表明,青海辣椒上检测得到的病毒为辣椒隐症病毒2。将其与PCV2-QH和PCV2-XJ的核苷酸序列进行分析,结果显示,二者存在多位点差异。本研究首次报道PCV2在青海发生。     

蚕豆萎蔫病毒2号青海辣椒分离物的鉴定与全基因组序列克隆

对青海省循化县的辣椒病毒病进行调查,采集到部分叶片表现萎蔫和皱缩症状的样品,该症状与蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)引起的症状相似。为准确鉴定是否为与该病害相关的病毒,将采集的20个辣椒样品用特异性引物进行RT-PCR检测,其中13个样品检测结果为阳性。在20份循化县辣椒样品中,有13份样品被确认感染了蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)。基于核苷酸序列的系统发育分析表明,检测到的病毒与BBWV2聚类在一起,与其他地区或国家分离物的序列一致性较高,与蚕豆萎蔫病毒1(BBWV1)和野芝麻轻型花叶病毒(LMMV)分离物的序列一致性相对较低。结果表明该辣椒样品感染的病毒是BBWV2。     

菌草杏鲍菇菌糟饲用安全性毒理学评价

通过急性毒性试验,30 d喂养试验对菌草杏鲍菇菌糟饲料进行饲用安全性毒理学评价。急性毒性试验采用最大耐受剂量法,30 d喂养试验分为3个试验组和1个对照组,对照组饲喂小白鼠基础日粮颗粒饲料,试验组分别饲喂菌糟替代5%、15%、25%小白鼠基础日粮的颗粒饲料。试验期内观察小白鼠的采食情况、精神行为等情况,试验结束后,全部小白鼠空腹眼眶取血,进行血常规分析。致死,进行解剖,准确称量各脏器重量,计算小白鼠脏器指数。试验结果表明,小白鼠急性毒性试验最大灌胃剂量为20 g/kg,根据急性毒性试验剂量分级标准,菌草杏鲍菇菌糟属于无毒级;在30 d的试验周期内,各组小白鼠均无不良反应发生,日常行为活泼,毛色顺滑光亮,雌、雄间无差异,试验组除增重量较对照组降低外,各试验组小白鼠胸腺、甲状腺和心、肝、脾、肺、肾等器官外观正常,病理学检查、脏器系数、血常规检测均未见异常;试验表明菌草杏鲍菇菌糟作为饲料原料应用是安全的,无毒副作用。     

青海省辣椒隐症病毒1的鉴定与全基因组序列克隆

【目的】明确青海省辣椒病毒病病原种类，获得乐都长辣椒的辣椒隐症病毒1(Pepper cryptic virus 1,PCV1)分离物的全基因组序列。【方法】2021年6月对青海省辣椒病毒病进行调查并采集疑似病样，对采集的样品分别用通用引物和特异性引物进行RT-PCR检测，后续通过克隆的方法得到PCV1的全基因组序列，用NCBI进行序列比对后用MEGA6.0软件最大似然法（maximum likelihood）、自导复制（bootstrap）1 000次构建系统进化树，并运用同源性分析和聚类分析方法对PCV1的2条RNA链进行分析。【结果】采自乐都区的15份辣椒病样中，确认检出10份感染PCV1，其RNA1和RNA2的全长分别为1 563 bp和1 495 bp。NCBI网站序列比对分析结果表明克隆得到的PCV1青海分离物序列与已报道的PCV1其他分离物的核苷酸序列一致性与氨基酸一致性高于95%。系统发育分析表明RNA1和RNA2分别与其他PCV1分离物聚在一支上，与其同属的辣椒隐症病毒2(pepper cryptic virus 2,PCV2)分离物聚在不同的分支上。【结论】青海省辣椒...