类蚕丝丝素结晶区蛋白表达载体的构建与表达

为探讨蚕丝结构与性能的关系,设计了几种类似蚕丝丝素结晶区高度重复序列结构(GAGAGX)n的基因序列,并构建了大肠杆菌表达载体,在BL-21菌株中成功诱导表达了4种约由110个氨基酸组成的小分子蛋白。对表达产物进行W estern印迹分析和ELISA检测的结果显示,(GAGAGA)n、(GAGAGY)n、(GAGAGV)n3种蛋白都有小于14.4 kD的大小相同的条带,而(GAGAGS)n有一条稍大于20.1 kD的条带。以超声波破菌的缓冲液作空白对照,4种蛋白的ELISA的结果均比对照的BL-21(无质粒)高,显示为阳性。     

基于张网渔获的蟹笼渔具对三疣梭子蟹的相对选择性

蟹笼渔具是东海近海重要的作业方式,安装释放装置是改善蟹笼渔具选择性的重要技术手段。作者通过海上试验,对比释放口宽度分别为25 mm和30 mm的试验蟹笼、对照蟹笼和张网的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)渔获,结合渔获方程和SELECT模型分析蟹笼的接触选择性和对张网的相对选择性。试验结果显示,张网渔具所捕获的群体较对照蟹笼更小;对比对照蟹笼渔获分布,分析试验蟹笼的接触选择性,结果显示,50%选择甲宽(l50)和蟹笼的捕捞能力随着释放口宽度的增大而增大,但选择范围(SR)基本不变。对比张网的渔获分布,获得蟹笼对三疣梭子蟹的相对选择性,结合张网和蟹笼的作业特点,将对照蟹笼的相对选择性视为蟹笼渔具的可捕率,结果显示,较大的个体更容易接触并进入蟹笼,50%概率接触并进入蟹笼的个体甲宽为98.7 mm;释放口宽度30 mm的试验蟹笼的相对选择性的l50(118.4 mm)和SR(10.5 mm)与接触选择性的l50(117.4 mm)和SR(9.5 mm)几无差异;对于释放口宽度25 mm的试验蟹笼,接触和相对选择性l50没有差异,但相对选择范围SR(5.6 mm)明显小于接触选择范围(11.3 mm),因此只考虑蟹笼的接触选择性而忽略其可捕率所得的结果可能会产生偏差。根据试验结果,本文对蟹笼渔具的可捕率的描述方式以及与蟹笼作业能力的区别进行了探讨。     

家蚕丝素结晶区典型多肽[GAGAGY]_(16)和[GAGAGV]_(16)的融合蛋白优化表达

家蚕丝素结晶区典型多肽[GAGAGY]16、[GAGAGV]16的GST融合蛋白KGY和KGV是深入研究家蚕丝素结晶区典型多肽聚集态结构的素材。对这2种融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件进行优化试验的结果表明,表达载体pGEX-KGY和pGEX-KGV能够有效表达家蚕丝素结晶区的这2种典型多肽。KGY和KGV的最佳诱导表达条件:IPTG浓度分别为0.2 mmol/L和1.0 mmol/L,诱导时间分别为5 h和4 h。在此条件下,2种融合蛋白在大肠杆菌中的表达量分别达115 mg/L和90 mg/L左右。诱导起始时大肠杆菌的菌密度(OD600为0.4～3.0)对2种融合蛋白的表达效率没有显著影响。     

茧丝纤度曲线的解析模型及其在模拟缫丝中的应用

建立了一种茧丝纤度曲线的统计解析模型 ,分析其用于模拟茧丝时茧丝纤度曲线的统计特性 ,证明这是一种有利于控制模拟生成的茧丝纤度特性的方法。通过计算机模拟试验讨论其在茧丝纤度曲线模拟及缫丝工程模拟中的应用。     

家蚕丝素结晶区高度重复多肽[GAGAGA]_(16)和[GAGAGS]_(16)的融合蛋白优化表达

为了给深入研究家蚕丝素结晶区的典型肽段结构提供素材,对设计的GST-tag家蚕丝素结晶区典型多肽[GAGAGA]16和[GAGAGS]16的融合蛋白KGA、KGS进行了表达条件优化试验。结果表明,pGEX-KGA和pGEX-KGS表达载体能够有效表达家蚕丝素结晶区的2种典型多肽,KGA和KGS的最佳表达诱导剂IPTG的浓度分别为1.4mmol/L、1.0 mmol/L,诱导时间为5 h。在此优化条件下,KGA和KGS在大肠杆菌(E.coli)中的表达量分别达75 mg/L、110 mg/L。诱导起始时大肠杆菌的菌密度(OD600为0.4~3.0)对2种融合蛋白的表达效率没有显著影响。     

类蜘蛛丝丝素蛋白SPF198在毕赤酵母中的分泌表达

将人工合成的长度为594 bp的类蜘蛛丝丝素蛋白spf198基因克隆到表达载体pP iczαA并导入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞内,利用筛选到的Mut+(m ethanol utilization p lus)重组酵母株进行了表达。初步的研究结果显示,spf198基因在GS115酵母里可以正确表达。     

桁拖网渔具分隔网片对蟹类的分隔效果

传统捕虾桁拖网渔具网目小、渔获对象繁杂、选择性能差。使用网片式分隔装置、实现渔具的选择性捕捞是缓解这一问题的有效手段之一。2005年秋汛期间,在吕四渔场桁拖网渔业中开展了网目尺寸分别为60、75和90 mm分隔网片的海上生产试验,本文通过蟹类渔获为研究对象,分析分隔网片对其的分隔效果。试验结果显示,使用以个体接触分隔网片概率和网片对个体的留存率为基础的分隔效率模型,对蟹类甲宽分布数据的拟合发现,随着网目尺寸的增大,分隔网片对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)、细点圆趾蟹(Ovalipes punctatus)的50%留存甲宽和留存率范围均有所增大;而上述2种蟹类个体接触不同网目尺寸分隔网片的概率则没有明显的一致性变化趋势。试验结果表明,蟹类在到达桁拖网网身部时具有一定的游泳能力且具有一定的游泳高度,也反映出使用向下倾斜的分隔网片在结构和装配上是比较合理的。