谷胱甘肽对哺乳动物配子及胚胎作用的研究进展

谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽,是一种非蛋白巯基类物质,它在机体内广泛分布,具有解毒和抗氧化作用.它易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐络合,因而发挥了整合解毒的作用.它的另一主要作用就是抗氧化作用,因为它可以清除掉动物体内的自由基,清洁和净化体内环境污染,能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被自由基等有害物质氧化,从而让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能[1].     

E-64对绵羊卵母细胞成熟过程中CTSB和CTSS基因mRNA表达水平的影响

利用实时定量PCR(qPCR)检测成年绵羊单卵体外成熟过程中空白对照组和E-64添加组0 h(卵泡期)、8 h、16 h、24 h(成熟期)4个时间点组织蛋白酶成员CTSB、CTSS及GAPDH的cDNA水平。结果表明,CTSB及CTSS的mRNA相对水平在成熟过程中呈现上升变化趋势,并且E-64可有效降低CTSB及CTSS的mRNA水平。细胞凋亡基因CTSB及CTSS mRNA的减少,对卵母细胞及胚胎发育质量的提高具有重要意义。     

羊卵母细胞冷冻保存研究进展

卵母细胞的冷冻保存在动物科学、临床医学等领域具有重要作用,同时,也可以为核移植、转基因等现代生物技术研究提供丰富的试验材料,使卵母细胞的供给不受时间和空间的限制。本文综述了羊卵母细胞冷冻保存及其损伤机制的研究进展,并指出了其存在的问题和应用前景。     

E-64对绵羊卵母细胞成熟过程中CTSB和CTSS基因mRNA表达水平的影响

本实验利用qPCR检测成年绵羊单卵体外成熟过程中空白对照组和E-64添加组0(GV)、8、16、24 h(MII)4个时间点CTSB、CTSS及GAPDH的cDNA数量。结果表明:CTSB及CTSS的mR NA相对数量在成熟过程中呈现上升变化趋势,并且E-64可有效降低CTSB及CTSS的mR NA数量。细胞凋亡基因CTSB及CTSSmR NA的减少,对卵母细胞及胚胎发育质量的提高具有重要意义。     

西洛酰胺对绵羊卵母细胞核成熟及后期胚胎发育的影响

本实验研究不同浓度西洛酰胺(Cilostamide)对绵羊卵母细胞核成熟的抑制效果,并探讨FSH对Cilostamide抑制效果的影响,以及延迟卵母细胞核成熟对随后胚胎发育能力的影响,旨在探索提高绵羊体外胚胎发育能力的新方法。结果表明:5μmol/L的Cilostamide为较合适的添加浓度,使卵母细胞核成熟延迟约4 h;FSH与Cilostamide对抑制核成熟起到协同作用;5μmol/L Cilostamide处理可使绵羊卵母细胞孤雌激活后囊胚率达到40.4%,显著高于对照组29.0%的囊胚率(P<0.05)。     

牛羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

卵母细胞玻璃化冷冻保存对于胚胎生物技术的发展具有重要意义,因其简便、快速、廉价等优点而广泛应用于人类辅助生殖、体外胚胎生产、转基因、克隆等方面.由于受到低温和抗冻保护剂的影响,卵母细胞在冷冻过程中都会造成形态和功能上的损伤,并且存活率和发育能力随之降低.本文以牛、羊卵母细胞玻璃化冷冻保存为例,对卵母细胞玻璃化冷冻保存的...     

绵羊单卵反转录平台的优化及应用

为了研究发育生物学中单个卵母细胞基因的表达,优化由单卵得到质量良好cDNA的操作步骤,试验应用试剂盒并增加质控环节,得到优质cDNA,同时将cDNA试用于差异显示PCR(DDRT-PCR)。结果表明:该试验方法得到的cDNA稳定性、重复性、完整性都很可靠。     

咖啡因和Scriptaid对绵羊核移植重构胚发育的影响

为提高绵羊体细胞核移植效率,以绵羊卵丘细胞为核供体,在融合后的核质互作期间加入咖啡因,在激活后对重构胚进行培养的过程中,加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid。结果表明:咖啡因浓度以2.5 mmol/L或5 mmol/L为宜,尽管卵裂率、桑椹胚率以及囊胚发育率与对照组差异不显著(P>0.05),但囊胚细胞数显著高于对照组(P<0.05);以0.2μmol/L Scriptaid处理组囊胚发育率最高,达24.31%,显著高于对照组和0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但与0.4μmol/L Scriptaid处理组相比差异不显著(P>0.05);囊胚细胞总数以0.2μmol/L Scriptaid处理组最高,显著高于0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但是与对照组和0.4μmol/L Scriptaid处理组差异不显著(P>0.05)。以上结果表明,咖啡因处理对绵羊核移植重构胚的囊胚发育率无显著影响,但可以显著提高囊胚细胞总数;Scriptaid可以显著提高绵羊核移植重构胚的囊胚发育率。