犬细小病毒NY株VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

试验旨在制备犬细小病毒（canine parvovirus,CPV）VP2蛋白多克隆抗体。构建pET28a-CPV-VP2重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化目的蛋白与佐剂混合、乳化制备后作为免疫原,免疫家兔制备VP2蛋白多克隆抗体;采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法（immunoperoxidase monolayer assay,IPMA）检测抗体的免疫活性、抗体滴度、病毒滴度及中和活性。结果表明,重组VP2蛋白（rVP2）以包涵体形式存在,分子质量约为72 ku;所制备的多克隆抗体滴度为1 600倍,病毒滴度为10⁷ TCID₅₀ /mL,中和效价为1∶2 884,该抗体与体外培养的CPV呈特异性反应,CPV VP2蛋白的多克隆抗体免疫活性和特异性良好,且中和活性高,为CPV基因工程疫苗的研究和临床治疗奠定了基础。     

犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转化E.coli BL21(DE3)表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白(rVP2)的分子质量约为72ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为0.2mmoL/L IPTG诱导4h表达量达到最高。rVP2不仅与His标签mAb反应,也能与CPV特异性阳性血清反应,说明rVP2具有良好的反应原性,为CPV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的研究奠定了基础。     

果胶酶和纤维素酶对五龙鹅养分表观利用率、消化酶活性及排泄物指标的影响

本试验旨在研究高纤维饲粮中添加果胶酶和纤维素酶对鹅养分表观利用率、消化酶活性及排泄物指标的影响。选用1日龄五龙鹅216只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复12只鹅。Ⅰ组饲喂高纤维基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在Ⅰ组饲粮基础上添加5 000、10 000、15 000 U/kg的果胶酶,Ⅴ组添加5 000 U/kg果胶酶和40 000 U/kg纤维素酶,Ⅵ组添加10 000 U/kg果胶酶和40 000 U/kg纤维素酶。试验期112 d。结果表明:1)Ⅴ、Ⅵ组干物质、粗蛋白质、粗纤维、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维和能量的表观利用率显著高于Ⅰ组(P0.05),钙表观利用率极显著高于Ⅰ组(P0.01);Ⅲ、Ⅳ组钙表观利用率显著高于Ⅰ组(P0.05)。2)4周龄时,Ⅴ、Ⅵ组胰腺淀粉酶活性、十二指肠淀粉酶和脂肪酶活性显著高于Ⅰ组(P0.05);16周龄时,Ⅴ、Ⅵ组胰腺淀粉酶和脂肪酶活性、十二指肠胰蛋白酶和脂肪酶活性显著高于Ⅰ组(P0.05),Ⅴ、Ⅵ组十二指肠淀粉酶活性极显著高于Ⅰ组(P0.01)。3)16周龄时,Ⅴ、Ⅵ组盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌的数量显著高于Ⅰ组(P0.05),产气荚膜梭菌的数量显著低于Ⅰ组(P0.05)。4)各组排泄物中大肠杆菌数量及总氮、总磷含量无显著差异(P0.05)。由此可见,饲粮添加果胶酶和纤维素酶可提高五龙鹅养分表观利用率和肠道酶活性,对排泄物指标无影响。     

高纤维饲粮中添加果胶酶和纤维素酶对五龙鹅生长性能、屠宰性能及肉品质的影响

本试验旨在研究高纤维饲粮中添加果胶酶和纤维素酶对五龙鹅生长性能、屠宰性能及肉品质的影响。选用1日龄五龙鹅216只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复12只鹅。Ⅰ组为对照组,饲喂高纤维基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础饲粮中添加5 000、10 000、15 000 U/kg的果胶酶,Ⅴ组在基础饲粮中添加5 000 U/kg果胶酶和40 000 U/kg纤维素酶,Ⅵ组在饲粮中添加10 000 U/kg果胶酶和40 000 U/kg纤维素酶。试验分1~4周龄和5~16周龄2个阶段,试验期16周。结果表明:1)与对照组相比,Ⅲ组显著提高了1~4周龄鹅平均日采食量(P<0.05),极显著降低了5~16周龄鹅料重比(P<0.01);Ⅵ组极显著提高了1~4周龄和5~16周龄鹅平均日增重(P<0.01),极显著降低了1~4周龄和5~16周龄鹅平均日采食量和料重比(P<0.01)。2)与对照组相比,Ⅲ组极显著提高了4周龄鹅的半净膛率、全净膛率(P<0.01),Ⅴ、Ⅵ组极显著提高了4周龄鹅的屠宰率、半净膛率、全净膛率和腿肌率(P<0.01),Ⅵ组极显著提高了16周龄鹅的屠宰率、半净膛率、胸肌率和腿肌率(P<0.01)。3)与对照组相比,Ⅲ组显著降低了鹅肉的失水率(P<0.05),Ⅵ组显著提高了肉色亮度(P<0.05),Ⅴ、Ⅵ组极显著降低了鹅肉的失水率(P<0.01)。由此可见,高纤维饲粮中添加10 000 U/kg果胶酶能够提高五龙鹅的生长性能和屠宰性能,10 000 U/kg果胶酶与40 000 U/kg纤维素酶配合使用效果更佳。     

数字化赋能电力营销提质增效

<正>党的二十大报告强调,“深入推进能源革命”“加快规划建设新型能源体系”。随着5G、大数据、云计算、人工智能等新技术新应用的蓬勃发展,数字化、智能化已成为传统电力行业转型发展的重要方向,而电力营销已然成为转型的重要战场之一。国网宁波供电公司正大力推进营销数字化建设,积极探索企业发展新路。当前,数字化对电力营销的积极影响主要体现在以下几个方面：通过数据分析和预测来优化电力需求和供应。通过分析历史数据和实时数据,数字化可以预测电力需求的变化,从而帮助电力公司更有效地调配资源,提高效率。     

猪细胞周期蛋白依赖性激酶2多克隆抗体的制备与鉴定

为研究猪细胞周期蛋白依赖性激酶2(pCDK2)的生物学功能,本试验构建重组原核表达载体pET28a-pCdk2,转化大肠杆菌BL21 (DE3)受体菌,用IPTG诱导重组蛋白(rpCDK2)表达并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定,蛋白经纯化及与弗氏佐剂乳化后免疫家兔制备多克隆抗体。分别用Western blotting和免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性。结果显示,成功表达了rpCDK2蛋白,该蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,可溶性rpCDK2蛋白分子质量约为38 ku,包涵体rpCDK2蛋白在38~43 ku间有3种不同分子质量形式;IPMA检测结果显示,所制备的pCDK2蛋白多克隆抗体与猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)免疫染色呈特异性反应,且Western blotting分析显示,多克隆抗体与这两种细胞的总蛋白反应出现4条特异性条带(分子质量在34~50 ku之间),可能跟pCDK2的多种磷酸化形式有关。本试验利用原核表达系统成功制备了rpCDK2蛋白,并制备了免疫活性和特异性良好的pCDK2蛋白多克隆抗体,为该蛋白生物学功能及相关疾病研究提供了基础材料。     

纳米混悬制剂在兽药中的研究进展

部分兽药原料药由于水溶性较差或渗透性较低，导致生物利用度低，不能发挥良好的疗效。将药物制成纳米混悬制剂，能够减小药物粒度，改善药物溶解度，增加药物溶出度，并改变药物在生物体内的药代动力学特征，有效提高生物利用度。另外，纳米混悬制剂具备制造方法简单、条件温和等优势，满足理想的兽药开发条件。本文就纳米混悬制剂的制备方法，及其在兽药应用领域给药途径进行了综述，为纳米混悬制剂在兽药领域的研制提供参考及借鉴。     

肽或蛋白质类纳米颗粒口服应用的最新研究进展

口服蛋白质或肽类药物因其良好的顺应性、方便性和经济性在临床上被广泛应用。然而口服给药面临强胃酸降解，粘液清除和上皮阻碍等限制，导致其生物利用度极低。在过去的二十年中，纳米医学的快速发展给临床科学带来了新的机遇。纳米颗粒(NPs)因其独特的耐受性、药理学特异性和生物降解性而被广泛的关注和研究。蛋白质或肽类NPs的开发进入了人们的视野。蛋白质或肽类NPs具有明显的优势可有效的克服消化道屏障实现高效精准的靶向递送和治疗。本综述首先介绍了肽或蛋白质类大分子药物口服给药面临的挑战，系统分析了肽或蛋白质类NPs的开发及应用现状，同时展望了NPs的前景。