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根据猪乳铁蛋白N叶(PLF-N)的蛋白序列和毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过全基因合成法合成改造后的PLF-N基因片段,将其克隆到pGAPZα-A质粒中构建分泌型重组酵母表达载体 pGAPZα-A- PLF。pGAPZα-A- PLF 通过限制性内切酶Avr Ⅱ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞SMD1168内。PCR检测结果发现,PLF-N基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在GAP启动子调控下,PLF-N重组蛋白获得分泌表达,其分子质量约为38 ku,上清表达量约为364 μg/mL。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,该表达产物对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较好的抑菌活性,且对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)分别为12.5、25.0 μg/mL。 相似文献
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正NPD(非生产天数)是指成年生产母猪和超过适配年龄的后备母猪应正常妊娠或哺乳,而未能正常妊娠或哺乳的天数。它是一个猪场生产力和具有经济竞争力的重要标志。有资料显示美国统计的117个猪场,最好的25%猪场的非生产天数为42.3天。而我国猪群的非生产天数平均为55~80天。NPD期间母猪耗料直接导致的结果就是成本上升、 相似文献
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为提高重组外源蛋白在毕赤酵母中的高效表达,试验采用毕赤酵母(Pichia pastoris)偏嗜性密码子改变抗菌肽cyclopsychotride的碱基序列,通过SOEing法合成后连接到pPICZα-C质粒上,从而获得分泌型重组酵母表达载体pPICZα-C-cyclopsychotride,再通过限制性内切酶BlnⅠ线性化,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞X-33中。结果表明:经PCR检测后及Zeocin抗性筛选,获得高拷贝转化子;通过琼脂孔穴扩散法检测,酵母表达上清液对革兰阳性菌和革兰阴性菌有抑菌活性;抗菌肽cy-clopsychotride经沸水、酸碱及胃蛋白酶处理后仍具有抗菌活性。 相似文献
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正当前猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)的防控方法众说纷纭,如何评估蓝耳病(PRRS)的感染状态及制定有效的防控方案仍然有很多谜底需要解开。此次有幸参加了第二十五届国际猪兽医大会(IPVS)及硕腾组织的蓝耳病防控卫星会议,现将有关PRRS的热点防控问题做简要分享。此次硕腾蓝耳病防控卫星会议邀请了4名国际蓝耳病防控专家做了主题报告,并与全球养猪业界的兽医、专家、生产者共同探讨PRRS在当前养猪业的流行形势及防控进展,给行业带来较为实用的PRRS防控方法。 相似文献
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胰高血糖素样肽-2(glucagon-like peptide-2,GLP-2),是胰高血糖素原基因在小肠上皮组织中由L内分泌细胞表达翻译后并处理加工的产物之一。它作为一个促进小肠黏膜生长修复物质,通过促进绒毛高度和隐窝深度的增长,从而增加肠道营养吸收的面积,同时GLP-2具有恢复和维持小肠黏膜上皮屏障的完整性、促进小肠损伤后的修复等作用。因此,GLP-2在动物营养上的应用前景广阔。从天然资源中提取GLP-2成本高、得率低、工序繁琐,而化学合成的价格又相当昂贵,半衰期较 相似文献
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