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为了对微小隐孢子虫(C.parvum)类钙调蛋白(CML)基因进行原核表达,分析重组表达蛋白的反应原性。以C.parvum卵囊cDNA为模板,用PCR方法扩增得到C.parvum CML基因。将CML基因连接到克隆载体pMD18-T,获得重组质粒pMD-CML,经限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,连接到经相同内切酶酶切的表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒,转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达。利用GST亲和树脂法纯化重组表达蛋白,对纯化的重组蛋白进行Western blot分析。结果表明,成功构建了重组原核表达质粒pGEX-CML,重组质粒转化菌经IPTG诱导后成功地表达出了分子质量约为51ku的重组蛋白rCML,纯化的蛋白rCML能与感染兔隐孢子虫(C.cuniculus)的兔血清发生特异性反应,具有很好的反应原性。 相似文献
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研究长期施用有机肥、化肥、有机肥与化肥配合施用及番茄不同生育期土壤碱解氮、速效磷、速效钾含量的动态变化。试验结果表明：长期施用有机肥可以提高土壤中速效养分的含量;当有机肥和无机肥配合施用时,其促进作用明显大于单施化肥;土壤速效养分的含量随番茄生育期变化较明显,番茄旺盛生长期土壤速效养分含量较高,几乎都在开花期达到最高水平,而在定植施肥前期和拉秧期含量都较低。 相似文献
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