牡荆总黄酮提取工艺优化及其对产气荚膜梭菌抑菌活性研究

【目的】 探究牡荆总黄酮的提取工艺，并探讨牡荆提取物对产气荚膜梭菌的抑菌活性。【方法】 以芦丁作为对照品，采用分光光度法对牡荆中的总黄酮含量进行测定；以总黄酮含量为考察指标，先通过单因素试验研究乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比4个单因素对牡荆总黄酮提取量的影响，确定单因素情况下最佳工艺的水平范围；在单因素试验基础上，通过设计L9（3⁴）正交试验，利用NaNO₂-AL （NO₃）₃-NaOH显色法对牡荆总黄酮含量进行测定，绘制标准曲线，计算回归方程，通过精密度、稳定性、重复性、加样回收率进行方法学考察，验证标准曲线。通过将试验所得数据代入标准曲线，比较得出牡荆总黄酮的最佳制备工艺，并在此基础上通过微量二倍稀释法考察其提取物对产气荚膜梭菌的抗菌活性。【结果】 牡荆总黄酮最佳提取工艺条件为：乙醇浓度60%、提取温度50 ℃、提取时间2.5 h、料液比1：35。在此最优提取条件下，牡荆总黄酮含量最高（43.17 mg/g）。其因素影响顺序为料液比>提取时间>乙醇浓度>提取温度，料液比对牡荆总黄酮含量影响最大。最佳工艺下的牡荆提取物对产气荚膜梭菌的最小抑菌浓度（MIC）值为7.81 μg/mL。【结论】 在乙醇浓度60%、提取温度50 ℃、提取时间2.5 h、料液比1：35的条件下提取的牡荆总黄酮含量最高，所制备提取物对产气荚膜梭菌具有较强的抑菌作用，为生产高质量的牡荆提取物提供了理论依据。