副猪嗜血杆菌重组P2蛋白的高效表达及间接ELISA方法的建立

根据GenBank中副猪嗜血杆菌(HPS)的P2蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用P2-PCR方法从HB070214株中克隆了1 077bp的P2蛋白基因。将P2蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-P2,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为60 500的可溶性融合蛋白P2-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的30%。将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达92.5%。用Western blotting分析纯化后的融合蛋白,显示良好的生物学活性。利用纯化融合蛋白作包被抗原及优化ELISA反应条件,建立了可检测抗HPS P2蛋白抗体的间接ELISA方法(P2-ELISA),并用所建立的P2-ELISA与国外进口的HPS检测试剂盒Synbiocits-ELISA对196份临床送检血清进行平行检测,阳性符合率为93.4%。结果表明,本试验建立的P2-ELISA与Synbiocits-ELISA具有同样高的特异性。     

立体景观绿化浅析 ——以老城区居民楼阳台及屋顶花园改造为例

老城区居民楼大多建筑结构性、功能性衰退,绿化功能明显不足,为改善居民生活环境、提高生态绿化率,以老城区居民楼屋顶绿化、墙体绿化、阳台绿化改造为例,从植物品种选择与搭配、立体绿化的形式与作用等进行分析,以实现老旧建筑物立体景观绿化系统.     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP1对猪体免疫抑制作用

为了研究高致病性PRRSVNSP1蛋白的免疫作用,本研究将高致病性PRRSVNSP1重组腺病毒（rAd—NSP1）接种体外培养的猪肺泡细胞（PAM）,用实时荧光定量PCR和ELISA方法分别检测IFN-γ和IL-10水平,结果为rAd—NSP1接种PAM细胞72h后可显著降低细胞上清中IFN-γ的水平,而IL-10的含量显著提高。将rAd—NSP1接种无PRRSV感染的30日龄商品仔猪,分别检测其外周血液淋巴细胞增殖作用和IFN-γ与IL-10的水平,结果显示,NSP1可显著减低淋巴细胞增殖和IFN-7的表达,同时诱导产生较强的IL-10反应。采用无PRRSV感染的30日龄商品仔猪免疫猪瘟疫苗后1周接种rAd—NSP1,结果猪瘟抗体的水平明显低于wtAd组（P〈0．05）,证明高致病性PRRSVNSP1蛋白具有免疫抑制作用。     

洛克沙胂对猪生产性能和血液指标的影响

本研究通过断奶仔猪、生长猪和肥育猪3个试验研究了日粮添加洛克沙胂对猪生产性能及血液指标的影响。试验分别选择96头杜×长×大三元杂交断奶仔猪(8.29±0.99)kg、生长猪(32.68±3.43)kg和肥育猪(62.74±8.89)kg,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复4头猪,公母各半。处理1为对照组,日粮中不添加洛克沙胂,处理2、3和4分别在日粮中添加50、100 mg/kg和150 mg/kg洛克沙胂。基础日粮为玉米-豆粕型,各处理日粮营养水平均为等能量、等蛋白。结果表明:日粮中添加洛克沙胂能显著提高断奶仔猪与生长猪日增重和饲料转化效率(P<0.05),减少仔猪腹泻率(P<0.01)。但对肥育猪增重效果不明显(P>0.05);日粮中添加洛克沙胂使动物血红蛋白、肌酐和谷草转氨酶含量升高,白蛋白含量降低(P<0.05)。表明洛克沙胂对猪具有一定的促生长效果,可增加动物血液运氧能力,但同时有可能对动物肝脏、肾脏造成一定损伤。     

副猪嗜血杆菌OMP P2基因的克隆与表达

利用已分离的菌株HB070412,根据NCBI上GenBank中的HPS序列（ZP_02477753）设计了1对引物,用PCR方法扩增了副猪嗜血杆菌外膜蛋白中的穿孔素前体蛋白P2基因（OMP P2）,并克隆到载体pMD18-T（T-Vec-tor）,序列测定结果表明OMP P2基因全长1 077bp,序列同源性分析表明该基因相当保守,与所报道的HPS OMPP2基因之间的核苷酸序列同源性为98.1%,氨基酸序列同源性为95.5%。用pGEX-6p-1构建了原核表达载体pGEX-P2,在大肠杆菌中进行了高效表达,表达蛋白约占菌体总蛋白的50%,主要为包涵体形式。SDS-PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白约为65 000,Western blot结果表明该表达蛋白具有抗原性。     

2种复方中草药添加剂对肉仔鸡生长和屠宰性能、免疫性能和组织病理学的影响

本试验旨在研究日粮添加不同水平的2种复方中草药添加剂(加曼-100和料磺1号)对肉仔鸡生长性能、屠宰性能、免疫性能和组织病理学的影响,以评价2种复方中草药添加剂的效果和适宜添加量。试验一、二各选用432只1日龄AA肉仔鸡,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复18只鸡。试验一中4个处理组分别在基础日粮中添加0(对照组)、500、1 000、1 500 mg/kg加曼-100;试验二中4个处理组分别在基础日粮中添加0(对照组)、1 500、2 000、2 500 mg/kg料磺1号,试验分前后两期(0~21 d、22~42 d)共42 d。结果表明:试验一中后期及全期时,与对照组相比,日粮添加加曼-100可提高肉仔鸡的平均日增重(P<0.01)并降低耗料增重比(P<0.01);1 000 mg/kg加曼-100组提高了肉仔鸡屠宰率、全净膛率、腿肌率(P<0.01)和半净膛率(P<0.05),降低了腹脂率(P<0.01)。试验二中,与对照组相比,日粮添加2 000 mg/kg料磺1号可提高肉仔鸡后期及全期的平均日增重(P<0.05)并降低全期的耗料增重比(P<0.05);同时提高肉仔鸡屠宰率、半净膛率、全净膛率(P<0.01)和腿肌率(P<0.05)。日粮添加加曼-100或料磺1号均提高了肉仔鸡血清免疫球蛋白水平(P<0.01),且各组间免疫器官指数均无显著差异,组织病理观察均无不良影响。综上,2种复方中草药添加剂可提高肉仔鸡生长性能、屠宰性能及免疫性能,加曼-100最适添加量为1 000mg/kg,料磺1号最适添加量为2 000 mg/kg。     

木质纤维素转化乙醇预处理工艺研究现状与发展趋势

能源问题日益严峻，乙醇作为一种绿色可再生能源正受到越来越多的关注。综述了以秸秆为原料转化乙醇技术的顸处理工艺，重点介绍了物理方法，化学方法和生物法等方面近年来的研究进展。     

预包装食品标签审核关键要素及对策

预包装食品标签标示的"食品名称、配料、营养成分表、生产日期、保质期、生产者、条码"等产品信息,是保障消费者合法权益的有效方式,也是消费者选购和了解食品信息的重要途径.近几年,因产品标签标示问题,食品企业被"职业打假投诉/索赔、职能部门查处"的事件屡有发生,扰乱了食品行业的健康发展.本文对预包装食品标签企业审核食品名称,...