鹿茸X型胶原基因的全长cDNA克隆及序列分析

采用RT-PCR和RACE技术,从鹿茸软骨细胞总RNA中扩增克隆了梅花鹿X型胶原（collagen X,colX）全长cDNA序列,并进行了序列特性分析。序列分析结果表明,梅花鹿colX全长cDNA序列为3135nt,其中5′非编码区96nt、3′非编码区1014nt和2022nt的开放阅读框编码674个氨基酸的鹿colX前体蛋白,与牛、猪、犬、人类和小鼠等脊椎动物colX氨基酸序列之间的同源性超过82%。按该基因氨基酸序列构建了进化树,揭示其与牛基因更加同源。     

猪IFN-β的克隆与原核表达

根据已发表的AY687281基因序列,设计1对特异性引物,采用PCR方法从长白猪白细胞基因组中扩增到猪β干扰素基因,将PCR产物克隆到pMD18-T载体,进行序列测定。序列分析表明,获得的猪β干扰素基因全长561bp,编码186个氨基酸,与GenBank中AY687281基因序列同源性达99.2%,在28、34、128位核苷酸发生了点突变,由G变为A,由C变为G,由A变为G,由C变为T,导致10、12、43位氨基酸由A变为T,L变为V,E变为G,而在177位点核苷酸的突变没有改变氨基酸。将该基因克隆到pEGX-4T-1表达载体中,转化宿主菌Rosetta,对猪β干扰素进行原核表达。重组表达菌经IPTG诱导后,得到高效表达,所表达蛋白约为43 000,占总蛋白的39.3%,表达产物主要为包涵体。纯化后的包涵体具有抗病毒的生物学活性,能抑制口蹄疫病毒（FMDV）增殖。     

高校新课程改革下茶文化的教育意义

随着我国高校新课程改革的不断推进,对于学生素质教育的迫切需求,使得高校在教学内容,教学手段等方面都需要加以创新与改革,从而适应现代教育的发展趋势。茶文化是我国传统文化的重要组成部分,其不仅展现出了高雅的意境,还蕴含着很多哲理与精神,非常适合高校学生学习,为此在高校课程改革下弘扬茶文化具有积极意义。     

架起沟通的桥梁——领导艺术中的沟通与协调能力

在现实管理工作当中,大量的工作都是在协调沟通,比如,我们管理当中有两个70%的关系,管理中第一个70%是什么,在管理中所进行的大量工作或者70%的工作是在进行协调沟通,比如谈判,比如座谈,比如面试,比如发E-MAIL,