人乳铁蛋白多克隆抗体的制备、初步纯化及其应用

制备并初步纯化人乳铁蛋白的多克隆抗体，然后将抗体用于该蛋白的检测。分别对8周龄的昆明白小鼠和12周龄的新西兰白兔进行多次皮下免疫注射，采集血清并用硫酸铵沉淀法进行抗体的初步纯化。将初步纯化的抗体用于抗体夹心ELISA法检测转基因小鼠乳汁中人乳铁蛋白的表达量。经三次免疫后的新西兰白兔和昆明白小鼠血清中抗体的效价分别达到了1：48000和1：24000，并能在较高水平上维持两周以上，经初步纯化后抗体纯度得到很大提高。用抗体夹心EUSA法能够测出转基因小鼠乳汁中人乳铁蛋白含量。使用皮下注射的方法对昆明白小鼠和新西兰白兔进行免疫来制备多克隆抗体是可行的，硫酸铵沉淀法纯化后的抗体去除了大多数杂蛋白，可以满足测定的需要。