接触抑制和血清饥饿对细胞周期的影响

为了研究血清饥饿和接触抑制2种常用的处理方法对供核细胞周期的影响,试验采用血清饥饿和接触抑制2种方法处理经过纯化的供核细胞,并用流式细胞仪检测处理后的供核细胞的细胞周期,通过Modfit软件分析不同处理方法对细胞周期产生的具体影响。结果表明:血清饥饿和同接触抑制2种方法处理过的细胞停留在G0/G1期和S期的细胞百分数差异不显著,但是同对照组细胞相比差异显著(P<0.05);停留在G2/M期的细胞百分数差异显著(P<0.05),但是同对照组细胞相比差异不显著(P>0.05)。     

放线菌酮处理对猪孤雌激活及体细胞核移植胚胎发育的影响

为研究放线菌酮(CHX)在猪卵母细胞孤雌激活和体细胞核移植中的作用效果,并验证其对胚胎发育的促进作用,实验对比体外成熟的猪卵母细胞经电激活后结合6-二甲氨基嘌呤(6-D)、细胞松弛素B(CB)或CHX激活后的孤雌囊胚率,及3种激活药物对体细胞核移植重构胚的发育能力的影响;在孤雌激活前用CHX预处理卵母细胞5 min,研究其对孤雌激活后胚胎发育能力的影响。结果表明:在孤雌激活过程中,CHX在激活8 h条件下囊胚率为48.0%,而CB和6-D处理4 h即可达55.2%和63.3%。而在体细胞核移植重构胚的激活中,采用CHX进行激活囊胚率为19.6%,高于CB的10.5%和6-D的16.5%,各组间差异显著(P>0.05)。孤雌激活前,卵母细胞经CHX预处理15 min可以提高CB或CHX激活的孤雌囊胚率。结果说明,CHX在孤雌激活能力较差,但对胚胎发育具有一定保护和促进作用。     

Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响

本研究旨在探讨Vero细胞共培养体系对猪胚胎早期发育的影响。收集屠宰场废弃卵巢,抽取卵母细胞。采用电激活联合化学激活的方法得到孤雌胚胎,同时用所得的卵母细胞与卵丘细胞构建猪体细胞核移植重构胚;并将所得的孤雌胚、核移植重构胚移入NCSU-23(培养液)中与Vero细胞共培养。结果,Vero细胞共培养组的囊胚率显著高于对照组(P0.05),各组囊胚细胞数无显著差异(P0.05)。结果表明,Vero细胞作为共培养体系中的滋养层细胞有利于猪胚胎的早期发育。