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猪主要组织相容性复合体(SLA)广泛参与机体免疫应答与调节,具有重要的免疫学研究意义。在转录水平上对猪瘟C株疫苗免疫后猪外周血单个核细胞(PBMCs)中SLA的表达情况进行了初步研究。猪瘟C株疫苗免疫试验猪后,在0、3、5、9d分别采集4头猪的抗凝血分离外周血单个核细胞,通过逆转录荧光定量PCR技术(RT-qPCR)对外周血单个核细胞中的SLA进行转录水平的相对定量检测;并对试验猪SLA上调表达明显的cDNA模板进行了SLAⅡ类分子的克隆、测序及其系统发育树分析。结果显示,猪瘟C株疫苗免疫后,PBMCs中SLAⅠ、SLAⅡ类分子在短时间内均出现上调表达,一段时间后发生回降;测序分析发现,上调表达的SLA-DRA、SLA-DRB分子中存在高频表达序列。结果提示,猪瘟C株疫苗能够刺激机体产生猪瘟病毒相关的免疫应答,并存在SLA等位基因优势选用现象,这种优势选用可为猪瘟表位肽疫苗的研制提供理论依据。 相似文献
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为了分析Spindlin1 (Spin1)蛋白对猪伪狂犬病毒(PRV)复制的影响，本研究利用GE Dharmacon siRNA网站设计3条Spin1 si RNA (siSpin1-376、siSpin1-537与si Spin1-654)，将其以1∶1∶1的比例混合，以30 pmol的剂量转染PK-15细胞，转染后48 h感染PRV He N1株，并分别于感染后6 h、12 h、18 h和24 h收集细胞及上清样品，进行病毒的TCID50测定，结果显示，与对照组相比，感染后12 h，干扰Spin1的表达能够显著促进PRV在PK-15细胞中的增殖(P<0.05)。将PRV以MOI 0.1感染PK-15细胞后不同时间，利用western blot检测PRV感染对Spin1蛋白表达水平的影响，结果显示，与转染siRNA-NO的对照组相比，PRV感染后12 h细胞中的Spin1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)，其余时间段与对照组均无显著差异。为了阐明PRV拮抗Spin1抗病毒作用的分子机制，本研究分别构建PRV早期蛋白EP0与Spin1的真核表达质粒并分别经PCR及测序鉴定... 相似文献
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