重组枯草芽孢杆菌产角蛋白酶的发酵培养基及发酵条件优化

角蛋白是潜在的优良饲用蛋白资源，其中角蛋白酶作为可特异性降解角蛋白的酶类，在角蛋白饲料化领域展现出广泛的应用潜力和价值。本研究以自主构建的重组角蛋白酶工程菌枯草芽孢杆菌WB600-pMA5-kerJY-23为研究对象，利用单因素和二次通用旋转组合设计试验对其摇瓶发酵产角蛋白酶的发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明：该菌株最佳发酵产酶条件为：葡萄糖25 g/L，蔗糖25 g/L，酵母浸膏20 g/L，硫酸铵10 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，氯化钠0.3 g/L，氯化钙0.025 g/L，硫酸镁0.025 g/L，硫酸亚铁0.015 g/L，氯化锰0.05 g/L，初始pH 8，装液量45 mL/250 mL三角瓶，接种量6%，培养温度37℃，摇床转速200 r/min，发酵周期36 h。在该优化条件下，重组枯草芽孢杆菌WB600发酵产角蛋白酶的酶活达到（2110±15.011）U/mL，较优化前提高了5.10倍（P <0.05），为该酶在角蛋白降解及资源化利用领域的应用提供了理论依据与研究基础。     

农业院校专业教师创新创业教育能力提升存在的问题及对策

在调研国内外教师创新创业教育研究经验和成果的基础上,结合地方院校教学实践,对当前农业院校创新创业教育中专业教师的培训及培养机制进行了系统分析,并提出缺乏有效的激励机制、双创教师实践能力偏弱、评价体系缺乏科学性等问题是制约当前双创教育的关键因素.在此基础上,针对性提出了双创教师队伍建设的一系列思路和对策,以期达到提高高校专业教师从事双创教育积极性的良好效果.对完善国内教师创新创业教育体系建设具有较好的借鉴意义.     

二甲戊灵微生物降解研究进展

二甲戊灵是一种广谱、高效的二硝基苯胺类除草剂.由于人们对其大量的生产和使用,该农药残留已经成为重要的环境问题.传统物理化学方法降解农药残留成本高、效率低、易造成二次污染等问题,生物法因具有高效、安全、无污染等优势在农残降解方面有巨大的发展前景.为推动二甲戊灵生物降解的研究,文中综述了二甲戊灵微生物降解菌株、降解代谢途径、降解相关基因的研究进展,并对现阶段二甲戊灵微生物降解研究存在的问题及未来研究方向进行了讨论,以期为微生物降解二甲戊灵残留的深入研究提供参考.     

菌糠多糖-纳米硒复合物的制备及其对水稻促生效果的研究

为探究菌糠多糖-纳米硒复合物对水稻的促生效果,以茶树菇菌糠多糖为原料,采用抗坏血酸为还原剂制备菌糠多糖-纳米硒复合物,并初步探索其对水稻种子萌发及水稻幼苗生长的影响。结果表明,当茶树菇菌糠多糖占比为10%、Vc与亚硒酸钠的配比为4∶1、反应时间为4 h、反应温度为50℃时,可以获得粒径最小且稳定的菌糠多糖-纳米硒复合物。该条件制备的茶树菇菌糠多糖-纳米硒复合物有一定的体外抗氧化能力,对水稻生长具有明显促进作用,且其促生效果高于单一的菌糠多糖,其中对水稻根部发育的影响尤为显著。进一步研究表明,当水稻幼苗叶面喷施菌糠多糖-纳米硒复合物浓度为20 mg·L^-1时,根和叶中可溶性蛋白含量比对照分别提高了72.62%和27.80%,叶中可溶性糖含量增加了180.87%,叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量分别增加了67%、58%、21%。叶面喷施对水稻的促生效果显著高于根部添加处理。本研究为菌糠多糖在农业领域的推广应用提供了理论与实践参考,同时也为利用外源性物质提高农作物生长提供了依据。     

TasA抑菌蛋白对烟草黑胫病的防治效果研究

【目的】烟草黑胫病是烟草疫霉菌侵染形成的一种严重危害烟草根茎的土传性疾病,给全球烟草种植业造成严重的经济损失。研究通过构建TasA蛋白原核表达重组菌,研究TasA对烟草黑胫病的抑制效果;并通过改变TasA蛋白的异源表达水平,以期提高该蛋白对烟草黑胫病的抑制效果。【方法】通过PCR扩增技术获得枯草芽孢杆菌抑菌蛋白TasA基因,构建大肠杆菌重组菌;并以烟草疫霉菌（Phytophthora nicotianae）为指示菌,研究TasA蛋白对烟草黑胫病的抑制效果。此外,通过改变克隆载体的拷贝数,研究TasA蛋白的表达量对其抑菌作用的影响。【结果】成功构建了三株大肠杆菌重组菌（pACYC-Tas A、pCDF-TasA及pT7473-TasA菌株）,且TasA蛋白在三株重组菌中都成功进行了异源表达,分子量为35 ku左右。pACYC-TasA菌株、pCDF-TasA菌株及pT7473-TasA菌株对烟草疫霉菌菌丝体均有抑制效果,抑制率分别为14.85%、25.55%及13.45%。【结论】抑菌蛋白TasA对烟草黑胫病具有显著抑制效果,且过表达pCDF-TasA重组质粒的工程菌对烟草黑胫病抑制效果...     

葛渣水解残渣为拜氏梭菌ART25吸附载体发酵生产丁醇的研究

【目的】探究固定化吸附环境对以葛渣水解液为原料进行丙酮丁醇发酵的影响。【方法】以经预处理的葛渣水解残渣为固定化吸附载体，研究不同载体添加量对以葛渣水解液为原料发酵生产丁醇的影响，同时从吸附环境下细胞活性、氧化还原电位及丁醇代谢途径关键酶活等角度探究添加固定化吸附载体（葛渣水解残渣）提高溶剂产量的内在机理。【结果】当载体添加量为10.0 g/L时，丁醇和总溶剂的产量最高，具体分别达到（9.92±0.05）g/L和（15.79±0.12）g/L，与对照组相比分别提高了13.29%和25.96%。在探究吸附环境影响丁醇合成的生理机制时发现，最佳吸附环境下的乙酸激酶、丁酸激酶、乙醇脱氢酶和丁醇脱氢酶的活性与对照组相比分别提高了33.90%、27.40%、14.53%和38.53%，表明吸附环境可提高丁醇代谢途径中关键酶酶活，从而提高溶剂产量。【结论】葛渣水解残渣可作为丁醇发酵过程固定化吸附载体，吸附环境可为细胞提供适宜生长环境及增强丁醇代谢途径中关键酶酶活，从而提高溶剂产量。