肯塔基沙门菌对氟喹诺酮和碳青霉烯类药物耐药性研究进展

肯塔基沙门菌（Salmonella Kentucky）是继鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌后又一与人类肠道疾病相关的沙门菌血清型，因其获得和传播耐药性的能力较强而逐渐引起关注。该血清型沙门菌按照多位点序列分型分得的众多亚型中，ST198血清亚型具有易获得耐药突变的基因组岛的特性，21世纪以来不断进化，除获得常见抗菌药物耐药基因外，还相继获得对氟喹诺酮类和碳青霉烯类药物的耐药性并扩散全球，造成临床上难以治疗的病例而引起世界卫生组织的关注。作者整理了肯塔基沙门菌的进化历程，着重阐述肯塔基沙门菌关于氟喹诺酮类及碳青霉烯类药物的耐药情况及耐药机制，以期为中国沙门菌的实验室防控监测系统提供理论依据。     

非洲猪瘟病毒传播媒介研究进展及猪场高效消毒剂的选用

非洲猪瘟因其致死率高和传播速度快，迅速扩散全国，给养猪业带来巨大经济损失。非洲猪瘟病毒结构独特、抵抗力强，而且我国具有其高适生存的钝缘软蜱，因此猪场生物安全防控应关注病毒和媒介两个方面，一方面要采取合适的消毒防控措施以及选择非洲猪瘟病毒专用的高效消毒剂，另一方面要加强对传播媒介的监测，未雨绸缪地研究杀虫剂和抗蜱疫苗。主要综述了非洲猪瘟病毒的传播媒介，包括中间宿主钝缘软蜱和一些储存宿主，以及针对病毒和这些传播媒介的消毒剂和杀虫剂的研究进展，以期为打好猪场生物安全防控的攻坚战和未来生猪的复养提供理论依据。     

HPLC法测定二氧化氯乳头消毒剂中乳酸的含量

建立HPLC法测定二氧化氯乳头消毒剂中乳酸的含量并研究此方法的耐用性。采用HPLC法,色谱柱为资生堂Capcell Pak C18 MG（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈（97.5:2.5,V/V）,检测波长为215 nm,流速为1 mL/min,柱温为35℃,进样量为20 μL。结果表明：乳酸在200～1 000 μg/mL内线性关系良好（R2=0.9999）,检测限为5 μg/mL,定量限为13 μg/mL,精密度试验峰面积RSD均符合标准,平均回收率为98.50%,供试品工作液在24 h内稳定。耐用性试验结果显示,在测试范围内,检测波长、流速、柱温、流动相比例和色谱柱对样品中乳酸的含量测定均无影响,且分离度符合要求。结论：此方法操作简易,可靠性高,可以用作该乳头消毒剂中乳酸的质量控制。     

复方季铵盐泡沫消毒剂成泡性能的优化及对病毒的杀灭效果评价

【目的】研究复方季铵盐泡沫消毒剂的成泡性能,并评估该消毒剂对新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）和猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）的杀灭效果,以及不同作用浓度和时间对消毒效果的影响。【方法】通过响应面法对复方季铵盐泡沫消毒剂中苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷3种成分的含量进行优化;采用悬浮杀灭试验,以细胞感染方法,测定该消毒剂稀释度为1：100、1：200、1：400、1：500、1：600、1：800和1：1 000时分别作用5、10和15 min对NDV LaSota株的灭活率;采用悬液定量法,测定该消毒剂稀释度为1：200、1：300、1：400、1：500、1：600时分别作用3、5、7、10和15 min对CSFV Thiveral株的灭活率。【结果】复方季铵盐泡沫消毒剂中主要成分苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷含量配比分别为1.4%、3.8%和0.75%时,成泡时间达到83 min。该消毒剂在稀释度最高为1：400（以总含量计约为137.5 mg/L）时,最短作用时间5 min,对NDV LaSota株灭活率为100%;最短作用时间为3 min时,对CSFV Thiveral株灭活率达到100%;作用时间延长至15 min时,对2种病毒的灭活率均稳定保持在100%。复方季铵盐泡沫消毒剂的稀释度低于1：400时,对NDV LaSota株杀灭效果不佳;稀释度为1：500（以总含量计约为110 mg/L）、1：600（以总含量计约为91.67 mg/L）时,作用时间10 min,对CSFV Thiveral株灭活率达到100%,作用时间延长至15 min时,灭活率稳定保持在100%。【结论】复方季铵盐泡沫消毒剂中苯扎溴铵、癸甲溴铵和癸基葡萄糖苷含量为1.4%、3.8%和0.75%时成泡效果最优,该消毒剂对NDV和CSFV杀灭效果较好,为其在养殖场的规范使用提供参考与理论依据,也为畜禽养殖业场地环境消毒效果评价提供更多的可能性。     

二氧化氯奶牛乳头消毒剂杀菌效果评价及杀菌机理研究

试验旨在对本实验室研发的用于奶牛乳头消毒的二氧化氯消毒剂进行实验室杀菌效果评价,并对二氧化氯的杀菌机理进行初步研究。采用定量法杀菌试验对二氧化氯奶牛乳头消毒剂进行实验室杀菌效果评价;利用透射电子显微镜观察二氧化氯作用后金黄色葡萄球菌超微结构的改变;利用流式细胞仪测定二氧化氯作用后金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的变化。定量法杀菌试验结果显示,当该消毒剂中二氧化氯的含量高于1.2 mg/L时,对无乳链球菌、铜绿假单胞菌的杀灭对数值高于3.00,即杀菌率高于99.9%;二氧化氯含量高于0.6 mg/L时,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌杀灭对数值高于3.00,即杀菌率高于99.9%;二氧化氯的含量为0.3 mg/L时,仍能有效杀灭表皮葡萄球菌、停乳链球菌;而二氧化氯含量高于28 mg/L,对于枯草芽孢杆菌的杀菌率才能达到100%。透射电子显微镜超微结构观察结果显示,100 mg/L二氧化氯作用于金黄色葡萄球菌5 min时,细胞膜出现了轻微的皱缩,细胞壁与胞膜之间出现了轻微的空隙,绝大多数细胞仍保持原有形态;作用15 min后,金黄色葡萄球菌形态发生了较明显的变化,细胞膜发生了明显的皱缩,细胞壁与细胞膜完全脱离,细胞质也出现了凝集。流式细胞仪检测金黄色葡萄球菌细胞膜通透性变化发现,二氧化氯处理后金黄色葡萄球菌细胞膜通透性发生了改变,其中含量为50 mg/L二氧化氯作用15 min后细胞膜通透性改变最明显。结合实验室杀菌效果评价结果发现,二氧化氯对细菌细胞膜通透性的改变仅仅是致死细菌的原因之一,二氧化氯对细菌的杀灭机理较复杂,仍需进一步的探索。