茶树油对三种常见致病菌的体外抑菌活性研究

为了确定茶树油的体外抑菌敏感度和最低体外抑菌浓度,本试验抑菌剂选择茶树油,供试菌选择沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,进行体外抑菌试验,并测定茶树油原液的抑菌圈以及不同稀释度的茶树油和1.5×108 cfu/ml菌悬液混合培养后在600 nm波长处的光密度值.试验结果表明,茶树油在3种细菌中对金黄色葡萄球菌最为敏感,...     

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物（FSE）预防性干预对对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照（NC）组、APAP肝损伤模型（LD）组、连翘提取物（FSE）对照组、连翘提取物高剂量（HFSE＋LD）组、连翘提取物中剂量（MFSE＋LD）组和连翘提取物低剂量（LFSE＋LD）组,每组10只。HFSE＋LD组、MFSE＋LD组、LFSE＋LD组分别按每天200、100、50 μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和过氧化氢（H₂O₂）水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红（HE）染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明：与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加（P<0.05）;肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低（P<0.05）,MDA、H₂O₂含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50 μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性（P<0.05）,显著提高肝脏中SOD活性（P<0.05）;200、100 μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平（P<0.05）,显著降低肝脏中MDA、H₂O₂水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量（P<0.05）。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。     

基于网络药理学研究连翘叶提取物通过AMPK抗恩诺沙星诱导肝损伤的作用

【目的】 运用网络药理学并通过体内试验研究连翘叶提取物（Forsythia suspense leaves extract，FSLE）治疗恩诺沙星（enrofloxacin，ENR）诱导的肝损伤（enrofloxacin induced liver injury，EILI）的作用机制。【方法】 采用乙醇-酶法提取连翘叶有效成分，通过液相-质谱法（LC-MS）鉴定FSLE主要的化学成分。利用PubChem、Swiss ADME和Swiss Target Prediction数据库分析预测FSLE有效活性成分及作用靶点，通过GeneCards疾病数据库搜索EILI的作用靶点。运用STRING在线网站及Cytoscape 3.8.0软件构建FSLE治疗EILI的核心靶点，借助Metascape网站进行GO功能及KEGG通路富集分析，并用Cytoscape 3.8.0软件绘制"成分-靶点-信号通路"可视化网络。通过体内试验验证FSLE抗EILI的药理作用，采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测不同处理组腺苷酸激活蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）的表达，通过商业化试剂盒检测还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）、过氧化氢（hydrogen peroxide，H₂O₂）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性。【结果】 结合LC-MS与各数据库分析得出FSLE活性成分有20种，对应靶点338个；EILI疾病靶点913个；药物-疾病交集靶点124个，包含FSLE治疗EILI核心靶点12个，KEGG通路20条，其中AMPK通路与FSLE治疗EILI密切相关。动物试验结果显示，FSLE可显著降低EILI小鼠血清中谷丙转氨酶（alanine transferase，ALT）和谷草转氨酶（aspartate transferase，AST）活力（P<0.05）。FSLE可显著升高小鼠肝脏AMPK的基因和蛋白表达量水平（P<0.05）。与正常对照组相比，FSLE可显著降低小鼠肝脏组织中MDA和H₂O₂含量（P<0.05），显著升高GSH含量和SOD活力（P<0.05），抑制EILI诱导的肝脏氧化应激。【结论】 FSLE可通过上调AMPK的表达抑制肝脏氧化应激发挥抗EILI的作用，对肝损伤药物的开发具有重要的意义。