微流体技术在家畜体外胚胎生产中的应用进展

体外胚胎生产技术是提高良种家畜繁殖效率的关键核心技术之一。然而，由于体内、外环境差异造成的卵母细胞成熟质量差、体外胚胎发育率低等问题严重制约了该技术的产业化应用。微流体技术是利用尺寸为几十到几百微米的微通道精确控制和操纵亚微米结构流体的科学与技术，由于其具有样品消耗少、分析速度快、高通量和高集成化等特点，正广泛应用于化学、医学、生命科学等领域。在家畜体外胚胎生产若干技术环节中，微流体技术显示出巨大的应用前景。本文综述了微流体技术在卵母细胞选择培养、精子分选、体外受精、体外胚胎培养以及配子和胚胎超低温冷冻保存中的应用进展，为提升家畜体外胚胎生产效率提供新思路。     

O-GlcNAc修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响

旨在探究O-β-N-乙酰葡糖胺（O-linked beta-N-acetylglucosamine,O-GlcNAc）修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响。本研究以牛卵母细胞为研究对象,检测O-GlcNAc转移酶（O-GlcNAc transferase,OGT）、O-GlcNAc糖苷酶（O-GlcNAcase,OGA）及O-GlcNAc蛋白在牛体外成熟卵母细胞中的分布;将卵丘-卵母细胞复合体分别在添加4 mmol·L^-1 OGT抑制剂BADGP和100 μmol·L^-1 OGA抑制剂PUGNAc的体外成熟液中进行体外成熟,将未添加组作为对照组,分别统计各组卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育率,并采用荧光定量PCR和Western blot检测O-GlcNAc蛋白、OGT、OGA、GFAT和TXNIP的mRNA和蛋白表达。结果表明,OGT和O-GlcNAc蛋白共定位于牛体外成熟卵母细胞的细胞质和细胞核中,而OGA和O-GlcNAc蛋白共定位于体外成熟卵母细胞的细胞质中,且相对集中在卵母细胞的皮质区。与对照组相比,BADGP处理组和PUGNAc处理组卵母细胞第一极体排出率（（52.8±5.1）%&（60.9±1.9）%vs.（70.8±5.4）%）和体外受精囊胚发育率（（9.6±4.9）%&（10.0±5.8）%vs.（21.5±4.3）%）均显著降低（P<0.05）。BADGP处理显著降低了OGT的表达,使卵母细胞的O-GlcNAc修饰水平发生下调,OGA的表达降低;而在PUGNAc处理组中,卵母细胞OGA的表达显著下调,O-GlcNAc修饰水平升高,OGT的蛋白表达显著减少;抑制OGT显著上调己糖胺生物合成途径关键限速酶GFAT mRNA的表达,而抑制OGA则显著下调GFAT mRNA的表达;此外,O-GlcNAc修饰水平改变显著上调了葡萄糖调控关键因子TXNIP的表达。研究结果表明,O-GlcNAc修饰水平改变会降低牛卵母细胞体外成熟及发育能力,卵母细胞通过反馈调节OGT、OGA、GFAT以及TXNIP的表达,应对O-GlcNAc修饰水平的波动。     

冬季不同修剪方式对高山巨峰葡萄生长及品质的影响

本研究以福建省屏南县巨峰葡萄为研究对象，开展冬季枝梢修剪试验，以探索高海拔山区不同修剪方式对葡萄生长发育的影响。旨为推迟物候期，避开倒春寒。结果表明：冬季采用中、长梢修剪较对照组（短梢修剪），其新梢粗度，大小果比例、物候期均有显著差异。新梢粗度减少至9.44 mm~10.10 mm，叶面积减少18 %~42 %，有效地削弱枝梢生长势；中、长梢修剪处理的大小果比例从对照的50.22 %分别下降到35.72 %和27.63 %，且果串均匀；物候期推迟近7 d。果实的可溶性固形物提升至20.84 %~21.86 %、可滴定酸下降至0.42 g/ml。本研究结果可为巨峰葡萄的高山种植在控制长势，推迟物候期以及提高果实品质提供理论依据。