围产期奶牛氧化应激初步预警体系的建立

旨在通过对围产期奶牛能量负平衡指标与其他血液生化指标的分析,初步建立围产期奶牛氧化应激的预警体系。本试验以能量负平衡为判定标准,BHBA>1.2 mmoI/L,NEFA>0.4 mmoI/L,GLU<3 mmoI/L为发病组,BHBA<1.2 mmoI/L,NEFA<0.4 mmoI/L,GLU>3 mmoI/L为健康对照组,各采集围产期发病组和对照组各25头奶牛的血液并对血中能量代谢、矿物质代谢、微量元素代谢、氧化应激、免疫抑制指标进行独立样本T检验和spearman相关分析,并利用logistic二元逻辑回归预测疾病,最后利用ROC分析确立分界值和诊断效果。结果显示:发病组奶牛血液中的Ca、GSH-Px、CAT、Ve、Mg、Se、Cu水平小于健康组;发病组奶牛血液中的IL-1、IL-6、CRP、IL-2、HP、TNF-α的水平高于健康组,表明能量负平衡的奶牛机体存在氧化应激并伴有炎症和矿物质代谢紊乱。奶牛血液中的Ca、Mg、GSH-Px、CAT、Cu、Se、Ve与BHBA呈显著的负相关,IL-1、IL-2、IL-6、HP、TNF-α与BHBA呈显著的正相关;奶牛血液中的Ca、Mg、GSH-Px、CAT、Ve、Cu与NEFA呈显著的负相关,IL-2、HP、TNF-α与NEFA呈显著的正相关;奶牛血液中的Ca、GSH-Px与GLU呈显著的正相关,IL-6、HP与GLU呈显著的负相关。经回归分析确定Ca、Mg、GSH-Px、CAT、Cu、Se、Ve、IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α、HP、BHBA 13项指标与围产期泌乳奶牛氧化应激相关,经ROC分析确立GSH-Px、CAT、Se、IL-6、IL-2、TNF-α、BHBA 7项指标可作为氧化应激发生的预警指标。结果表明,因此,能量负平衡、VE、Se缺乏、炎性因子增多和矿物质代谢紊乱是奶牛产后氧化应激发生的风险因素,但VE和Ca未成为氧化应激的预警指标。初步证实了围产期奶牛氧化应激发生的预警指标,为今后更有效的监控和预防奠定理论基础。     

黑龙江省两牛场围产期奶牛氧化应激的群体检测和预警

为确定围产期奶牛氧化应激的风险因素及其预警指标,在黑龙江省2个集约化牛场(A、B场)检测了120头围产期奶牛血中能量代谢、矿物质、氧化应激等指标,以能量负平衡为判定标准,将β-羟丁酸(BHBA)>1.2mmoI/L,游离脂肪酸(NEFA)>0.4mmoI/L,葡萄糖(GLU)<0.3mmoI/L的牛分为高水平氧化应激组,BHBA<1.2mmoI/L,NEFA<0.4mmoI/L,GLU>0.3mmoI/L的牛分为对照组,通过横截面研究方法结合统计学显著性分析,Spearman相关分析、二元Logistic回归模型及ROC分析确立分界值和诊断效果。结果显示:能量负平衡奶牛血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、Se、总一氧化氮合成酶(T-NOS)、VE的水平降低,血中丙二醛(MDA)、Cu的水平升高,机体存在氧化应激。确定GSH-PX、CAT、Se、BHBA四项指标可作为氧化应激发生的预警指标,其预警值分别为:GSH-PX<619.28U/L,敏感度78.3%,特异度66.7%;CAT<7.87U/mL,敏感度73.9%,特异度91.7%;Se<0.51μg/L,敏感度79.2%,特异度58.9%,BHBA>0.72mmoI/L,敏感度100%,特异度83.3%。结论:产后能量负平衡、低Ca、Se和VE的缺乏是引起氧化应激的风险因素以及血中GSH-PX、CAT、Se、BHBA可作为氧化应激发生的预警指标。     

猪高致病性蓝耳病、圆环病毒病和链球菌病混合感染的诊断

为了对黑龙江省某猪场发生的猪病确诊,首先采用了流行病学调查、临床检查和病理解剖初步怀疑是猪圆环病毒病和链球菌病混合感染,然后无菌取病猪脾脏、淋巴结进行细菌分离,分离纯化后的细菌经革兰氏染色、生化实验和动物实验,鉴定为猪链球菌;提取脾脏和淋巴结DNA、RNA经PCR检测出猪圆环病毒和猪高致病性蓝耳病毒的核酸阳性条带。说明了该病猪确系猪圆环病毒、猪高致病性蓝耳病毒和猪链球菌的混合感染。药敏试验结果表明,该分离菌对青霉素、链霉素、庆大霉素、卡那霉素不敏感,对头孢咪唑、环丙沙星、氟哌酸高度敏感。并结合猪场的发病情况和试验结果提出了防疫方案和治疗措施,为猪场防治猪圆环病毒病、猪高致病性蓝耳病与链球菌混合感染提供了参考。     

犊牛轮状病毒和大肠杆菌混合感染检测

黑龙江省某规模化奶牛场部分新生犊牛发生了严重腹泻且犊牛病死率较高。为了确诊,无菌采集病料,通过病毒检测、细菌分离、生化试验、细菌和病毒特异性基因PCR扩增、动物致病性试验及药敏试验等方法进行了病毒抗原和微生物检测。结果显示,病毒检测中牛轮状病毒（BRV）呈阳性,PCR扩增得到400 bp的特异性片段;从病料中分离到1株含K99和F41兼性菌毛抗原的高致病性产肠毒素大肠杆菌（ETEC）,该分离菌株对恩诺沙星、头孢唑啉、氯霉素敏感,对其他抗生素有一定的耐药性。流行情况调查结合病原学检查确诊该牛场新生犊牛严重腹泻是由BRV和大肠杆菌混合感染造成的,根据诊断结果进行了针对性地防制,取得了良好的防控效果。     

产后泌乳奶牛尿液pH值与瘤胃酸中毒的关系及其预警作用

为了探讨尿液pH值与产后泌乳奶牛瘤胃酸中毒的关系及其预警作用,试验随机选取产后90 d内荷斯坦奶牛40头,依据健康奶牛尿液pH值范围(在7.7～8.7之间)将其分为酸性组(pH值7.7)和中性组(pH值在7.7～8.7之间),通过Afikim管理软件查询试验牛瘤胃酸中毒情况,测定试验牛尿液pH值,并对试验牛血液/尿液中的矿物质元素、炎性因子、能量代谢指标的水平进行组间独立样本t检验,利用斯皮尔曼相关系数分析相关性,二元回归分析预测疾病,最后利用工作特征曲线(ROC)分析确定分界值。结果表明:通过Afikim管理软件查询,酸性组奶牛20 d内瘤胃酸中毒发病率显著高于中性组(P0.05),酸性组与中性组相比尿液pH值显著降低(P0.05);酸性组与中性组相比,矿物质元素血液K含量显著降低(P0.05)、尿液Ca和P含量显著升高(P0.05),炎性因子脂多糖(LPS)含量显著升高(P0.05),能量代谢指标β-羟丁酸(BHBA)、血尿素氮(BUN)、尿液尿素氮(UUN)和游离脂肪酸(NEFA)含量显著升高(P0.05),葡萄糖(GLU)含量显著降低(P0.05);相关性分析显示,瘤胃酸中毒与尿液pH值呈极显著负相关(P0.01),与尿液Ca、P呈极显著正相关(P0.01),与血液NEFA呈显著正相关(P0.05);二元回归分析显示,尿液pH值、P和血液Ca、NEFA这4项营养代谢指标可作为奶牛瘤胃酸中毒的发生的风险预测指标;ROC分析确定,瘤胃酸中毒的最佳尿液pH值的分界值6.55,尿液pH值能作为奶牛瘤胃酸中毒的预警指标。说明产后泌乳奶牛尿液pH值可作为预测奶牛瘤胃酸中毒发生风险的评估指标。     

围生期奶牛能量负平衡与免疫抑制的关系

为了探讨围生期奶牛能量负平衡与免疫抑制的关系,试验随机选取2个集约化牛场围生期奶牛各60头,以能量负平衡为判定标准,β-羟丁酸(BHBA) 1. 2 mmol/L、游离脂肪酸(NEFA)0. 4 mmol/L、葡萄糖(GLU)0. 3 mmol/L为发病组,BHBA 1. 2 mmol/L、NEFA 0. 4 mmol/L、GLU0. 3 mmol/L为对照组,对试验牛能量代谢指标、矿物质代谢指标、免疫功能指标进行组间独立样本t检验和Spearman相关性分析,并利用二元Logistic回归分析预测疾病,最后利用受试者工作特征曲线(ROC)分析确立分界值和诊断效果。结果表明:发病组奶牛血液中Ca、Mg、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的水平和对照组奶牛相比差异极显著(P0. 01),发病组奶牛血液中C反应蛋白(CRP)、结合珠蛋白(HP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平和对照组奶牛相比差异显著(P0. 05),并且发病组奶牛血液中的Ca、Mg水平低于对照组,IL-1、IL-2、IL-6、HP、CRP、TNF-α的水平高于对照组; IL-1、IL-2、IL-6、HP、TNF-α水平与BHBA浓度呈显著或极显著正相关(P0. 05或P0. 01),Ca水平与GLU浓度呈极显著正相关(P0. 01),IL-2、HP水平与GLU浓度呈显著负相关(P0. 05),Ca、P、Mg水平与NEFA浓度呈显著或极显著负相关(P0. 05或P0. 01),IL-2、HP、TNF-α水平与NEFA浓度呈显著正相关(P 0. 05);经二元Logistic回归分析确定Ca、IL-1、IL-2、IL-6、HP、TNF-α水平6项指标与围生期泌乳奶牛免疫抑制相关;经ROC分析确立了HP、TNF-α2项免疫抑制指标的预警值为HP 29. 49 ng/L、TNF-α219. 90 ng/L。