牛初乳sIgA等电点的测定

采用等电聚焦电泳法测定牛初乳sIgA的等电点。牛初乳sIgA的pI为5．02—5．67,比相关报道更加精确。回归方程：y=0．7543x＋3．1635,相关系数r=0．9989,表明线性关系良好,为牛初乳sIgA的离子交换层析制备条件的选择提供了可靠的理论依据。     

牛初乳sIgA分离纯化及其检测方法的研究进展

利用牛初乳开发新的功能性食品和类母乳化食品是当前研究热点,而在牛初乳中,sIgA是一种重要的免疫球蛋白,因此分离及检测牛初乳中sIgA具有重大现实意义。目前分离纯化方法主要有亲和色谱法、嗜硫色谱法、离子交换法、超滤法、酶解法等,检测方法有高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、辣根过氧化物酶标记凝集素法、免疫胶体金检测法等。文章对sIgA分离纯化及检测方法进行了简要介绍。     

牛初乳sIgA的分离纯化

为进一步开发利用牛初乳sIgA等生物活性物质，采用盐析、超滤、凝胶过滤层析等技术从牛初乳中分离纯化获得sIgA，采用非还原SDS—PAGE和Western blot对目标产物进行定性定量鉴定。结果表明，所制备sIgA纯度达85．3％，该制备方法为sIgA工业化生产提供了理论和实验依据。     

反相高效液相色谱法检测牛初乳乳铁蛋白的方法研究

为了建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定牛初乳乳铁蛋白的含量,采用Kromasil C4色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水-三氟乙酸(80:20:0.1)流速0.6 mL/min;检测波长:220nm;柱温:25℃.乳铁蛋白的检测线性范围为0.025-1 mg/mL,回归方程为Y=734105X-8035.9,相关系数r=0.999,平均回收率为99.58%,相对标准偏差为1.3%.此方法操作方便、快捷、精密度好、结果准确可靠、重复性好.     

高效液相色谱法检测牛初乳sIgA方法研究

建立高效液相色谱法测定牛初乳sIgA含量。采用TSK-G3000PWxl凝胶色谱柱以0.02mol/L,pH6.8的磷酸盐缓冲液为流动相,流速0.6mL/min,检测波长280nm。结果表明,牛初乳sIgA纯度为52.56%,回收率为74%。说明此方法方便、快捷、准确、可靠、重现性好,可用于牛初乳sIgA含量的检测。