猪瘟病毒对新城疫病毒激活的IFN-β启动子的抑制研究

为了研究猪瘟病毒(CSFV)对IFN-β产生的影响,我们利用荧光素酶报告基因系统测定了CSFV Shimen株感染猪肾细胞PK15后人源IFN-β启动子的诱导情况,以及以新城疫病毒(NDV)作为诱导剂建立了细胞内IFN-β诱导的模型,基于该模型,我们探讨了CSFV对病毒活化的IFN-β启动子的影响。研究表明,不管条件如何改变,CSFV Shimen株都不能诱导活化IFN-β启动子。NDV可以有效诱导激活IFN-β启动子,且能与CSFV共感染同一个PK15细胞。深入研究发现,CSFV Shimen株能很好地抑制NDV对IFN-β启动子的活化,尤其是CSFV先于NDV感染或两病毒同时感染PK15细胞时,抑制效果最为明显。CSFV的这种抑制IFN-β启动子激活的特性在一定程度上解释了猪瘟病毒持续感染的机理,为抗病毒药物的设计和新药的开发以及病毒病的治疗提供了一定的借鉴。     

猪瘟病毒E0蛋白对IFN-β启动子的抑制作用研究

以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为IFN-β诱导剂,将猪瘟病毒(Classical swine fever vires,CSFV)E0基因的C末端与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protem,EGFP)基因相连,瞬时表达于猪。肾细胞PK15中,利用荧光素酶报告基因系统检测IFN-β启动子的活化状态,结果显示CSFV E0蛋白可抑制NDV对IFN-β启动子的诱导作用,抑制效应随E0蛋白量增加而增强;半定量RT-PCR结果显示,E0蛋白可明显降低IFN-βmRNA的生成量。结果表明,E0蛋白具有干扰素拮抗功能。该研究为阐明CSFV的致病及持续感染机制提供了理论支持。     

猪瘟病毒E~(rns)蛋白RNase活性与免疫抑制功能的相关性研究

猪瘟病毒Erns蛋白是具有多功能的结构蛋白,具有RNase活性和免疫抑制功能。为阐明猪瘟病毒Erns蛋白RNase活性与免疫抑制间的相关性,对决定RNase活性的2个关键氨基酸进行基因突变(297H→K和346H→K),使Erns丧失RNase活性。荧光素酶报告基因系统研究发现,失去RNase活性的Erns蛋白仍能抑制由新城疫病毒诱导的IFN-β启动子的活化作用。表明Erns蛋白的免疫抑制功能并不依赖于RNase活性。