抗大肠埃希氏菌(Escherichia coli)K88抗原特异单克隆抗体的研究

用淋巴细胞杂交瘤技术得到了株抗E.coli K88抗原的特异单克隆抗体(MCA):JLZK-7,-10和-178。小鼠腹水中MCA的免疫荧光滴度达10~(-5)～10~(-6),直接凝集滴度为 1:500～1:5000,比用常规方法生产的因子血清高100～1000倍。JLZK-7为IgG_1亚类,JLZK-10为IgG_(26)亚类,JLZK-178为IgG_3亚类。这3株MCA与K88阴性大肠杆菌和肠杆菌科中的其他细菌无交叉反应。对K88阳性菌株的反应性测定表明,JLZK-7是对K88ab、K88ac和K88ad菌株都起反应的群特异MCA,JLZK-10和-178是分别仅与部分K88ab菌株和部分K88ac菌株反应的型特异MCA。试验结果表明,这3株MCA可用于初生仔猪下痢病的诊断和大肠杆菌K88血清型鉴定。     

商品猪在运输中应激反应磷酸肌酸激酶(CPK)的变化

<正> 近十多年来,国外对于商品猪由于运输过程中的不良因素的刺激发生应激反应的学说报导甚多。我国也已经开始有这方面的研究,但对于因应激而引起的磷酸肌酸激酶(CPK),肌糖元的变化国内尚无报道。为此,我们对能反映应激性程度的两个主要指标CPK和肌糖元作了研究,本文将着重介绍血清CPK的变化与测定方法,其肌糖元将另有专论。     

鸡新城疫病毒F_(48)E_8毒株多肽的特性测定

试验用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鸡新城疫病毒(NDV)F_(48)E_8毒株的多肽结构,发现该病毒用2-疏基乙醇降解后的74kHN蛋白是非降解状态下125kL'蛋白的降解产物,该结果经免疫电泳转移试验(WB试验)得到了证实。WB试验中,抗NDV单克隆抗体能与一条或数条NDV F_(48)E_8毒株多肽发生反应。     

抗大肠埃希氏菌(E.coli)粘着素K88的特异单克隆抗体的产生及其特性测定

用等电点沉淀和葡聚糖凝胶柱层析法从大肠埃希氏菌C83901株(08:K87,K88_(ab))培养物分离和提纯K88_(ab)抗原,并以200ug/只的剂量免疫BALB/c纯系小鼠。第三次免疫后72小时取免疫小鼠脾脏淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP_2/0—Ag14进行融合,得到能分泌抗K88_(ab)特异单克隆抗体的杂交瘤细胞系4个,分别命名为JLZK—1、JLZK—4、JLZK—7和JLZK—10。经多次克隆后,JLZK—7和JLZK—10在体外长期培养仍能稳定地分泌特异单克隆抗体。用JLZK—7和JLZK—10接种经降植烷(Pristane)激化的BALB/c小鼠所产腹水的免疫荧光滴度高达10~4—10~6,直接凝集反应滴度高达10~2—10~4。免疫荧光试验和直接凝集试验表明JLZK—7单克隆抗体能与所试验的含K88_(ab)或K88_(ac)抗原的全部大肠埃希氏菌反应,而不与K88抗原阴性的大肠杆菌和肠杆菌科的其他细菌起反应,是针对K88_(ab)抗原中成分a的型共同的单克隆抗体。另一方面,JLZK—10单克隆抗体只与大肠埃希氏茵中的K88_(ab)阳性菌株起反应,不与K88_(ac)阳性茵株和K88阴性菌株起反应,是针对K88_(ac)抗原中成分b的型特异单克隆抗体。     

用于骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞增殖以及杂交瘤细胞抗体产生的无血清培养基

小鼠骨髓瘤SP#-2/0细胞和小鼠杂交瘤7E8细胞不需经低浓度血清的适应性培养即能在无血清培养基Ⅰ（SFM-Ⅰ）中良好生长、增殖。培养获得的最大活细胞密度分别为2.57×10#+6/ml和1.88×10#+6/ml,对大于1×10#+6/ml活细胞密度的维持时间均为84小时。这两方面均优于用无血清培养基Ⅱ（SFM-Ⅱ）或用有血清培养基Ⅱ（SCM-Ⅱ）培养的效果。SFM-Ⅰ培养7E8细胞的培养上清中,特异性单克隆抗体ELISA效价为1∶800,与SFM-Ⅱ和SCM-Ⅱ培养上清的效价相同。SFM-Ⅰ可望用作杂交瘤细胞体外大规模无血清培养生产单克隆抗体的首选培养基。SFM-Ⅱ培养的细胞从初始密度增殖至1×10#+6/ml时,其增殖速度与有血清培养基相近,大于SFM-Ⅰ培养细胞的增殖速度。用SFM-Ⅱ进行SP#-2/O、7E8和大鼠骨髓瘤IR983细胞的连续传代培养,细胞始终圆整、立体感强,具有高度活力和较快的增殖速度。SFM-Ⅱ适宜用于骨髓瘤和杂交瘤细胞的无血清传代培养。     

用于检测对虾弹状病毒的抗生蛋白链霉素-生物素增强型硝酸纤维膜酶免疫测定方法

建立了一种抗生蛋白链霉素-生物素增强型硝酸纤维膜酶免疫测定法,(streptavidin-biotin-enhanced nitrocellulose enzyme immunoassay)用于感染动物组织中对虾弹状病毒的检测。初步试验表明,该方法能测出少至10个蚀斑形成单位的病毒。     

用单克隆抗体对新城疫病毒分离物的血清学初步鉴定

根据1株 ND 单抗与 NDV 分离物在 IIF 试验中的反应性,将8株 NDV 分离物划分为 a、b、c、d、e、f6个不同反应谱组,此反应谱与对照株(F_(48)E_8、NM、I 系、I 系和 La Sota株,)和11株 ND 单抗之反应谱各不相同。HI 试验表明,8株 NDV 分离物的 HA 活性都能被鸡新城疫阳性血清所抑制:大部分 NDV 分离物的 HA 活性能被ND 单抗 F_(2(?)-5-8-4)、L_(2-3-1)、Lc_(24-11)、L_(15-(5))、LE_(22-3)和 M_(10)所抑制;部分 NDV 分离物的 HA 活性能被 ND 单抗LD_(2-3-(7))和 L_(10-4)所抑制;8株 NDV 分离物的 HA 活性均不能被 ND 单抗 FHY_(33-29-3)所抑制。以上结果表明,8株 NDV 分离物之间以及与 NDV 对照株间存在抗原性差异。     

土壤盐分胁迫对甜高粱茎秆糖分积累及蔗糖代谢相关酶活性的影响

【目的】研究土壤盐分胁迫对甜高粱茎秆中糖分积累及蔗糖代谢相关酶活性的影响,探明盐胁迫条件下甜高粱茎秆的糖分积累特征。【方法】以甜高粱杂交品种"辽甜1号"为研究材料,采用高效液相色谱法和酶学测定方法,对5种不同土壤盐分(分别为对照CK(0.102%)、T1(0.215%)、T2(0.250%)、T3(0.300%)、T4(0.459%),以上为质量分数)胁迫下,甜高粱各生育时期(拔节期、孕穗期、开花期、灌浆期、成熟期)茎秆中的糖分(葡萄糖、果糖、蔗糖)含量和糖代谢相关酶(蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶合成方向(SS-s)、蔗糖合成酶分解方向(SS-d)、中性转换酶(NI)、酸性转换酶(AI))活性进行测定。【结果】(1)甜高粱茎秆总糖在灌浆期积累最多,蔗糖是影响总糖含量的主要因素,土壤盐质量分数在0.215%~0.300%时,总糖、蔗糖含量随盐胁迫程度加深呈现增加的趋势。(2)低盐胁迫(0.215%~0.300%)可使甜高粱茎秆中SPS、SS-d、SS-s、AI活性增加,而对NI活性无显著影响。(3)甜高粱茎秆中总糖含量与蔗糖含量和AI活性呈显著正相关,而与其他酶无显著相关性。【结论】甜高粱茎秆糖分累积是各种酶共同作用的结果,其中AI是调控甜高粱茎秆总糖的关键酶。