BV—SIVenv亚单位疫苗接种恒河猴的特异性CD8^＋Tc动态变化

用人ＥＢＶ转化恒河猴的自体Ｂ淋巴细胞，再以表达ＳＩＶ不同抗原成分的重组痘苗病毒ＶＡＣ－ＳＩＶｅｎｖ，ＶＡＣ－ＳＩＶｇａｇ感染，制备＾５１Ｃｒ释放试验的靶细胞。恒河猴于制备Ｂ淋巴细胞物四肢内侧静脉采血，分离淋巴细胞，采用＾５１Ｃｒ释放试验检测动物体内的ＣＤ８＾＋Ｔｃ特异性细胞免疫反应，对靶细胞的杀伤活性在１６．７％～２０．２％之间，并可在体内维持３个月之久；在靶细胞数量ＳＩＶ亚单位疫苗可使部分（１６     

β干扰素转基因小鼠的建立和特性研究

选择ICR小鼠为受试动物,应用显微注射仪,将线状人β干扰素基因,按2940～10000拷贝,1～3pL的剂量注射到供体受精卵的雄前核,然后移植到假孕受体的输卵管。实验先后注射了301个受精卵,移植到20只假孕受体,其中5只妊娠,产仔25只。从所获得的25只亲代小鼠的尾组织提取DNA,用内切酶BamHI消化,以[α-~(32)P]-dCTP标记的上述外源基因为特异性核酸探针,应用DNA印迹法检测这些小鼠DNA内外源基因的整合状况.结果表明,亲代小鼠中有人β干扰素基因重组子的转基因小鼠,杂交带在6.8kb位置。应用上述同样方法对亲代转基因小鼠的子1代组织DNA检测发现,绝大多数小鼠的标本除见到1条1.8kb人β干扰素基因的较弱杂交带外,还有数条5.0kb以上强弱各异的杂交带,表明这种外源基因不仅整合到了亲代小鼠的遗传物质内,而且可经垂直方式传给子代。人β干扰素基因的鼠体水平表达检测发现,1只子1代转基因小鼠的肿瘤组织浸出液中含有人β干扰素,滴度达160U/mL,表明整合在小鼠DNA内的人β干扰素外源基因不经诱导而有一定表达。     

布氏菌M_5弱毒苗接种豚鼠的细胞免疫应答

本试验以豚鼠作为实验动物,接种布氏菌M_5弱毒苗(简称M_5)后,经不同间隔时间连续心脏无菌采血,应用T玫瑰花结试验、淋巴细胞转比试验(H~3—TdR掺入法)及皮肤变态反应试验等多种方法,对接种动物的T细胞动态变化进行了系统测定。 试验发现,免疫动物在接种后第36天,活性T玫瑰花结百分率为27.3％,对照组为20.6％;免疫动物的T淋巴细胞在整个试验期间均呈现较强烈的特异性增殖反应,除免疹后第69天的以外,其它三次试验的组平均刺激指数均高于对照组。于免疫后第118天对10只接种豚鼠进行了皮肤变态反应试验,其中6只呈阳性反应。 试验证明,接种豚鼠的T细胞应答具有如下重要特征:(1)M_5接种豚鼠可出现活跃的细胞免疫应答;(2)于接种后的一个月左右免疫动物的T细胞增殖反应达到高峰;(3)当血清凝集抗体消失时,多数动物的细胞免疫应答仍然维持在正常水平以上;(4)免疫动物再次接触相应抗原时,可出现较强烈的T细胞回忆反应;(5)特异性T淋巴细胞刺激与皮肤变态反应之间具有密切关系。特异性微量全血H~3—TdR掺入法术式简单、方法敏感、结果可靠,是布氏菌菌苗免疫效力评价的一种新的有效方法。     

驴胎皮肤继代细胞核型的初步分析与鉴定

对18代驴胎皮肤继代细胞染色体作了初步分析与鉴定。精确计数分析结果为二倍体61％,多倍体3.7％,亚二倍体15％,超二倍体6％,断裂1％;核型分析为62/XY型。     

哺乳动物胚系外源基因的导入及表达

哺乳动物胚系外源基因的导入和表达研究是以显微注射技术为主要导入手段的基因工程和移植胚胎学的有机结合。以哺乳动物胚系作为研究对象远不如鱼、蛙类受精卵和原、真核细胞方便,在受精卵制备、体外培养、移植发育及外源基因导入等方面均受到复杂技术条件的限制。随着实验手段和胚胎移植技术的不断改进,近几年来这一研究领域在基因导入方法和动物新种构建方面已有重大突破,“巨型”小鼠构建的成功,预示     

人LPL基因调控序列的结构特点和体内外功能研究

在克隆了人ＬＰＬ基因５＇端、３＇端和基因间调控序列的基础上，构建了多种含ＣＡＴ报告基因的表达重组子。经对人ＬＰＬ不同缺失变异型启动子功能的体内、外分析，发现在５＇端序列中存在着与组织特异性表达和分化有关的ＬＰ－α、ＬＰ－β，以及位于－７０２、－４８６、－６６６和－４３０区的调控结构。转基因小鼠体内的ＰＨＬＰＬ４．０＋ｉｎｔｒｏｎ和ｐＨＬＰＬ４．０＋３＇，不仅呈现了很强的启动活性，而且对－４．０ｋｂ     

竹醋液对不同品种烤烟种子萌发和幼苗生长的影响

【目的】研究竹醋液对不同品种烤烟种子萌发及幼苗生长的影响,为其在烟草生产上的应用提供参考。【方法】采用室内培养皿种子萌发试验和温室育苗方法,分别设50、100、200、400倍竹醋液稀释处理,以清水为对照,测定云烟97、贵烟2号、韭菜坪2号、毕纳1号和红花大金元种子发芽和云烟97烟苗生长的相关指标。【结果】与对照相比,使用不同浓度竹醋液抑制了不同烤烟品种种子的萌发和生长,各烤烟品种的种子发芽率、种子发芽指数、幼苗全长、根长和茎长、鲜重出现不同程度降低,且大部分达显著水平（P〈0．05,下同）;50倍竹醋液处理完全抑制了供试烤烟品种种子的萌发。随着培养皿中竹醋液浓度的增加,各烤烟品种种子发芽率、种子发芽指数、幼苗全长、根长、茎长、鲜重均呈降低趋势;除红花大金元外,其他烤烟品种的种子活力指数表现为：100倍〈200倍〈400倍〈对照,且各处理间差异显著。在幼苗期对云烟97叶面喷施不同浓度竹醋液,与对照相比,除200倍处理的茎围、50倍处理的最大叶长和100倍处理的叶片叶绿素含量外,喷施不同浓度竹醋液可不同程度提高云烟97幼苗的株高、茎围、最大叶长和叶宽、干物质重、根系体积。不同浓度竹醋液处理中,以100倍处理株高、最大叶长和根系体积最高,分别为3．36cm和10．14cm、0．92mL;以400倍处理的烟苗茎围、干物质重、最大叶宽达到最高,分别为1．82cm、0．262g和5．74cm。【结论】在培养皿中添加不同浓度竹醋液会抑制烤烟种子萌发和幼苗生长;漂浮育苗过程中,对幼苗叶片喷施100-400倍竹醋液,可在不同程度上促进幼苗生长并改善其质量。     

BV－SIVenv亚单位疫苗接种恒河猴的特异性CD8~＋Tc动态变化

用人ＥＢＶ转化恒河猴的自体Ｂ淋巴细胞，再以表达ＳＩＶ不同抗原成分的重组痘苗病毒ＶＡＣ－ＳＩＶｅｎｖ、ＶＡＣ－ＳＩＶｇａｇ感染，制备５１Ｃｒ释放试验的靶细胞。恒河猴于制备Ｂ淋巴细胞３０ｄ后，皮下接种ＢＶ－ＳＩＶｅｎｖ亚单位疫苗，每只动物１ｍＬ于强化免疫后的３０、６０、９０ｄ，从动物四肢内侧静脉采血，分离淋巴细胞，采用５１Ｃｒ释放试验检测动物体内的ＣＤ８＋Ｔｃ的动态变化。结果：１９只免疫恒河猴中，有３只于强化免疫后呈现明显的ＣＤ８＋Ｔｃ特异性细胞免疫反应，对靶细胞的杀伤活性在１６．７％～２０．２％之间，井可在体内维持３个月之久；在靶细胞数量不变，渐次增加效应细胞时，免疫细胞的ＣＤ８＋Ｔｃ的杀伤活性随数量增加而增强。从而证明该ＳＩＶ亚单位疫苗可使部分（１６％）免疫动物产生较好的特异性细胞免疫反应。