大肠杆菌内毒素(CET)提制方法的改进及对其制剂的评价

本文对大肠杆菌内毒素(CET)的提制方法——“简化热水——酚法”作了如下改进:①直接用湿菌体进行制备,省略了制干菌粉的步骤,使制备周期由13天减少为11天;②透析液加以离心提纯;③提制过程中,把丙酮改用酒精,节省了费用;④最后程序增加一次再溶解和再沉淀。改进后的产品数质量有明显提高:内毒素收获量提高了64％;产品纯度上,粗制品含氮量减少22.86％,含磷量减少61.55％,O.D260/O.D280下降0.305;精制品含氮量0.393％,含磷量1.25％,O.D260/0.D280为1.41;家兔Shwartzman反应半数皮肤预备剂量(SPD_(50))为改进前的1/16,小于在同等试验条件下的国家参考标准品;对鲎试剂促凝活性优于改进前产品和国家参考标准品;小白鼠LD_(50)为改进前产品的1/2。因此认为,改进的“简化热水——酚法”具有一定的应用和推广价值。