猪细小病毒的危害检测与防控

猪细小病毒(porcine parvovirus，PPV)是Mayr和Mahnel(1966)进行猪瘟病毒组织培养时首先发现的，并认为是细胞内潜伏感染的病毒。Cartwright和Huck(1967)首次从猪流产的胎儿中分离到了PPV，证明了它的致病作用。     

香蕉枯萎病拮抗菌株BS11抗真菌活性物质的研究

[目的]对枯草芽孢杆菌BS11抗真菌活性物质进行研究,为该菌株的进一步开发应用提供参考。[方法]比较了枯草芽孢杆菌BS11在LB和NB培养基上的生长情况,比较了3种方法提取该菌株活性物质的效果,并探讨了该菌株的最佳培养条件。[结果]以香蕉枯萎病菌为指示菌,发现拮抗菌在LB和NA 2种不同培养基中有很明显的差别,LB培养基中生长繁殖速度快,但上清液活性很低,NA培养基中繁殖速度较慢,上清液活性却较好;乙醇沉淀法和乙酸乙酯萃取法均不能提取到活性物质,硫酸铵沉淀法基本上可将活性物质提取出来;BS11最佳的培养条件为初始p H7,温度30℃,通气量60 ml;发酵上清液有蛋白酶、纤维素酶活性,但没有几丁质酶活性。[结论]枯草芽孢杆菌BS11株所产的抗真菌活性物质具有性质稳定、广谱、易于提取等优点,为其应用于植物病害防治提供了理论依据。     

鸡新城疫病毒强毒株的分离及生物学特性鉴定

用SPF鸡胚及鸡胚成纤维细胞，从病死鸡的脑组织中分离到一株病毒。此病毒能凝集鸡的红细胞，而且这种凝集可以被特异性抗血清所抑制。通过对分离株进行回归实验，MDT、ICPI、IVPI及其他生物学特性实验、空斑实验、中和试验、电镜观察等，证实该分离株为新城疫病毒强毒株。     

野油菜黄单胞菌效应蛋白AvrXccC与拟南芥BIK1在植物体内相互作用

 AvrXccC是野油菜黄单胞菌Xcc8004的一个III型分泌效应蛋白。前期研究发现AvrXccC在拟南芥rar1突变体上发挥毒性功能,并且抑制植物的先天免疫反应。但是,AvrXccC在植物体内的毒性靶标还不清楚。本研究发现AvrXccC与植物体内的蛋白激酶BIK1发生特异的相互作用。然而,在拟南芥原生质体中,AvrXccC 并不能抑制鞭毛蛋白诱导的BIK1迁移,表明AvrXccC不是通过抑制BIK1的磷酸化来发挥功能的。有趣的是,AvrXccC可以在体外直接被BIK1磷酸化,我们推测AvrXccC可能作为BIK1的底物从而干扰了鞭毛蛋白诱导的先天免疫反应。     

新城疫病毒野毒株(HBG-1)的F蛋白部分序列同源性分析

采用RT-PCR双方法对分离自河北省某鸡场的一株新城疫病毒(HBG-1)的核苷酸进行扩增，获得了分离株Fo裂解位点附近的基因片段，经测序分析，并与国际上已发表的新城疫病毒的核酸序列进行比较，结果表明其与标准株和疫苗株之间的同源性较低，仅为82%～86％之间。运用计算机软件对其裂解位点处的氨基酸顺序进行预测和分析，结果表明该分离株为新城疫病毒强毒株并具有基因Ⅶ型的典型结构特征。     

ATAF2正调控拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性

橡胶树白粉菌(Oidium heveae)侵染拟南芥野生型Col-0，激发拟南芥的抗病反应。该抗病反应依赖于EDS1（enhanced disease susceptibility 1），EDS1在TIR-NB-LRR（Toll-Interleukin1 Receptor-nucleotide binding-leucine-rich repeat）类抗性基因介导的抗病信号通路中发挥非常重要的作用，但目前还不清楚具体的EDS1上、下游作用元件是什么。为了进一步研究橡胶树白粉菌在拟南芥上激发的抗疾信号通路，本实验室对接种橡胶白粉菌oidium heveae HN1106的拟南芥野生型Col-0进行了RNA-Seq数据分析，结果表明，拟南芥Col-0在接种橡胶树白粉菌4 d后，NAC家族 (ATAF1,2 and CUC2, NAM)转录因子ATAF2基因上调表达20倍，并且正调控拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性。另外，笔者通过体外蛋白质pull-down试验和体内原生质体免疫共沉淀试验，发现ATAF2可以直接与EDS1发生相互作用，这为将来进一步阐明EDS1抗病信号通路奠定了很好的基础。     

SGT1正调控橡胶树白粉菌在拟南芥上激活的抗病性

通过在拟南芥野生型Col-0和突变体sgt1b、eds1上接种橡胶树白粉菌Oidium heveae HN1106,分析了白粉菌细胞进入率、叶片发病症状、菌丝生长状态、细胞死亡和活性氧产生等表型。结果表明,与野生型Col-0相比,橡胶树白粉菌在拟南芥sgt1b上激发的早期抗病性、后期抗病性以及抗病反应部分降低,暗示着SGT1在稳定识别橡胶树白粉菌的抗性蛋白方面发挥着非常重要的作用。     

3个基因共同参与拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性

通过在拟南芥野生型Col-0和突变体sag101,eds1及pad4上接种橡胶树白粉菌Oidium heveae HN1106,分析了拟南芥早期抗病性和后期抗病性表型。结果表明:与野生型Col-0相比,橡胶树白粉菌在拟南芥突变体sag101,eds1和pad4上激发的早期抗病性、后期抗病性以及抗病反应都显著降低,突变体eds1感病性最强,pad4次之,sag101最弱,暗示着PAD4与SAG101在橡胶树白粉菌抗性方面存在功能互补,三者共同参与了拟南芥对橡胶树白粉菌的抗病性。     

海口玉米小斑病病原菌的分离及抗病自交系的筛选

为了明确发生于海南海口永兴镇的玉米小斑病的病原菌,本研究对玉米叶片发病部位进行了病原菌的分离鉴定。结果表明,8个病原菌分离株在PDA培养基上生长形态基本一致,通过对其中一个分离株HNBM011菌丝生长和孢子形态进行显微观察,以及ITS序列分析,发现该病原菌为玉蜀黍平脐蠕孢菌(Bipolaris maydis),与四川玉米小斑病病原菌分离株(Bipolaris maydis isolate) DY-5-2高度同源。回接实验进一步证实了HNBM011分离株为玉米小斑病病原菌。此外,通过对68种不同的玉米自交系接种HNBM011,筛选出一个高抗玉米自交系金博士825父本和一个高感自交系乐农79母本,这为将来克隆抗玉米小斑病基因,实现抗病育种奠定了基础。     

效应蛋白OhEF 2正调控拟南芥对橡胶树白粉菌的感病性

白粉菌通过在植物细胞内形成吸器,产生大量的效应蛋白,从而实现在寄主细胞内的侵染。前期有研究人员对Oidium heveae进行基因组和转录组测序分析,预测出133个潜在的效应蛋白。笔者克隆了其中的一个基因OhEP2 (Oidium heveae Effector Protein 2),并构建了OhEF 2基因在拟南芥Col-0背景下的过表达转基因植株。通过接种发现,过量表达OhEF 2可以明显促进拟南芥对橡胶树白粉菌的感病性,但不能提高假单胞菌DC 3000的毒性功能,表明OhEF 2可能只在白粉菌侵染的过程中发挥作用。进一步研究发现,OhEF 2显著降低了橡胶树白粉菌在拟南芥上激发的胼胝体沉积和PR1 (Pathogen-Related Gene1)基因表达,这为进一步研究效应蛋白OhEF 2在植物体内的毒性作用机理奠定了基础。