苎麻生物脱胶复合菌群的构建

分别从沤麻池、苎麻脱胶厂污泥、老麻园土和腐烂麻堆等生境收集自然菌群,采用室内温水沤麻的方法检测它们的原始脱胶能力,结果表明:这些自然菌群的脱胶能力较弱,使苎麻分纤分别需要12 d、18 d、14 d和10 d,脱胶后的纤维强度极低,最高只有2.83 cN/dtex,失去了工业利用价值.将不同来源的菌群等比例混后用于脱胶试验,其分纤周期为8d,分纤时纤维强为2.58 cN/dtex.以苎麻为唯一碳源和能源对复合菌群进行长期驯化,分别在驯化至69 d、89 d、182 d和407 d发现其分纤周期缩短到了5d、4d、3d和2.2 d,而且随着分纤周期的缩短,纤维强度也逐渐提高.复合菌群驯化407d后,分纤周期稳定在50h左右,分纤状况良好,纤维强度达到了5.52 cN/dtex.     

DNA提取方法对苎麻脱胶菌群PCR-DGGE结果偏移的影响

为筛选和优化出较适宜的苎麻脱胶菌群DNA提取方法,本文分别以来自苎麻沤麻环境的6种纯培养菌等丰度混合物和苎麻自然沤麻菌群为材料,研究＂溶菌酶-SDS＂法、＂超声波-溶菌酶-SDS＂法、＂蛋白酶K-SDS＂法以及＂冻融-蛋白酶K-SDS＂法4种DNA提取方法对菌群16Sr DNA基因PCR-DGGE偏移结果的影响。结果表明,4种方法均能从2类材料中提取出了超过1600ng/μL的DNA,不同方法之间DNA产率略有差异,经过超声波处理或反复冻融处理的DNA有明显的降解,但4种方法提供的DNA模板均扩增出了450bp的16Sr DNA基因片段。4种DNA提取方法对DGGE结果有明显影响,且只有＂冻融-蛋白酶K-SDS＂法检测到了纯培养菌混合物中的全部6种细菌,4种方法获得的自然沤麻菌群的DGGE指纹图谱也明显不同,最多产生17条带（＂冻融-蛋白酶K-SDS＂法）,最少只有9条带（＂溶菌酶-SDS＂法）,增加超声波或冻融等物理处理可以使部分弱带变强。因此,组合应用物理、生物和化学等细胞裂解方法可以提供更有代表性的DNA,可减少PCR-DGGE结果的偏移。