胶体金免疫层析法快速检测烟草环斑病毒

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记烟草环斑病毒的抗体 ,制成免疫层析检测试纸条。检测粗提纯病毒的灵敏度为 1 0 0 0ng/ml,病汁液稀释 1 0 0 0倍后仍可快速检出。对大豆病种子、烟草冻干病叶等不同材料进行检测也有良好的效果 ,1～ 2min即可出现结果。用 9种不同的病毒进行测试 ,未出现非特异性反应。     

植物病毒检测新技术研究进展

本文主要介绍了酶联免疫吸附测定、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、免疫PCR等血清学方法和PCR、分子信标、实时RT-PCR、核酸杂交等分子生物学方法的原理及特点,并重点介绍了近几年发展起来的免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、分子信标和TaqMan实时RT-PCR等植物病毒检测技术.     

北京怀柔地区樱桃上发现李属坏死环斑病毒

 李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)属雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)等轴不稳环斑病毒属(Ilarvirus),是我国二类检疫性有害生物。PNRSV主要危害李属和蔷薇属植物。如,樱桃、桃、李、月季等。春季感染PNRSV的樱桃早期幼叶会出现深棕色坏死斑和线纹,叶片展开期坏死斑脱落造成穿孔症状。受PNRSV危害后,果树树势减弱,产量降低,甚至死树。我国学者调查陕西、辽宁和山东等省的果树病害时发现并报道了该病毒^[1~3]。     

烟草线条病毒RT-PCR检测方法

根据已报道的烟草线条病毒外壳蛋白基因序列，设计出一对特异性引物，提取大豆病叶的总RNA，反转录成cDNA，PCR扩增出约400bp大小的产物，产物克隆到pGEM-T Easy载体上，转化大肠杆菌DH 5α，抽提的质粒用Not Ⅰ酶切，出现430bp大小的目标插入片段。经序列测定确认了插入片段的大小为404bp。     

马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒的兔多克隆抗体。用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好病毒检测线和羊抗兔抗体质控线,制成免疫层析检测试纸条。马铃薯X病毒试纸条检测烟草病汁液可稀释10000倍(重量/体积)马铃薯Y病毒试纸条检测烟草病汁液可稀释1000倍。10min内即可出检测结果。两种试纸条相互测试,未出现交叉反应。用健康和缓冲液对照测试,两种试纸条结果都为阴性。田间采集的马铃薯叶片用试纸条检测的结果和酶联结果相吻合。在密封、干燥、低温的条件下保存,有利于维持试纸条的稳定性。     

低量优化喷雾防治水稻病虫害的研究

长期以来，我国的农药使用技术较落后，农作物病虫害防治基本上仍以手动大容量粗放式喷施方法为主，由于喷施量大，药液的雾滴大而不均匀，很难均匀有效附着到作物或虫体上，大部分流失到地上或田水中，从而不能取得良好的防治效果。有资料表明手动大容量喷施，药液在作物...     

引起葡萄黄化病的植原体及其检测

由植原体引起的葡萄黄化病 (ＧｒａｐｅｖｉｎｅＹｅｌｌｏｗｓ,ＧＹ) ,是野生和栽培葡萄的危险性病害。它们的危害可使葡萄树的活力受到影响 ,葡萄产量下降 ,果实酸度提高且含糖量下降 ,导致葡萄品质降低。所有的欧洲葡萄Ｖｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａ都对ＧＹ感病 ,只是程度有所差异。一些著名的酿酒品种如Ｒｉｅｓｌｉｎｇ ,Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ ,ＧａｂｅｒｎｅｔＳａｕｖｉｇｎｏｎ ,Ｐｉｎｏｔｎｏｉｒ等对ＧＹ高度感病。此外 ,许多独特的酿酒品种 ,如酿造法国白兰地酒 ,以及意大利和西班牙名酒的那些具有原产地栽培特性的葡萄品种 ,对…     

进口美国大豆上发现大豆花叶病毒

大豆作为种子在我国是禁止进境的,但是每年仍有相当数量用作榨油的大豆经口岸入境。１９９７年１２月由烟台动植物检疫局送检的美国大豆,经隔离温室种植观察,发现了一株大豆花叶病毒,现报告如下。１材料与方法１．１应检样品来自美国路易斯安那州的大豆（ＵＳＡ．Ｎｏ...     

黄瓜绿斑驳花叶病毒磁免疫层析试纸条的研制

用磁性纳米颗粒标记黄瓜绿斑驳花叶病毒的兔多克隆抗体建立了简便快速的磁免疫层析试纸条检测方法。该方法检测提纯病毒的灵敏度为0.1 μg/mL,检测葫芦病汁液可稀释10 000倍(重量／体积)。试纸条和黄瓜绿斑驳花叶病毒具有特异性反应,和同属的烟草花叶病毒、番茄花叶病毒、辣椒轻斑驳病毒和齿兰环斑病毒,未出现交叉反应。该试纸条可用于田间病害检测和诊断。     

番茄环斑病毒和烟草环斑病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的研制

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的兔多克隆抗体,用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好2条病毒检测线（T线）和1条羊抗兔抗体质控线（C线）,制成复合型免疫层析检测试纸条。一张试纸条在10min内,可同时检测出这两种病毒。试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒粗提纯液,检测灵敏度在1μg/mL,试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的混合病汁液可稀释1000倍（重量/体积）。用健康叶片和缓冲液对照测试,试纸条结果都为阴性。