乌药ISSR扩增条件的优化

为了确保ISSR分析的可靠性和重复性,有必要进行ISSR-PCR反应体系的优化.以浙江省天台山乌药(Lindera aggregata)自然种群随机个体的基因组DNA为研究对象,通过对反应体系中的Mg2 浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、Taq DNA聚合酶用量、BSA浓度、引物用量进行筛选和优化,得出了适用于乌药ISSR分析的扩增条件:10μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(200 mmol·L-1 Tris·HCl,PH 8.8,100 mmol·L-1 KCl,1%Triton X-100,100 mmol·L-1(NH4)42S04,20 mmol.L-1MgCl2),0.5U Taq DNA聚合酶,10 ng模板DNA,10 pmol引物,0.4mmol.L-1dNTP.利用优化反应体系从100个ISSR引物中筛选出12个重复性好、稳定性高的引物对20个乌药个体的DNA进行扩增,共得到142个位点,其中,102个为多态位点,多态位点百分率为71.83%,Nei指数为0.284 3,Shannon信息指数为0.415 3,乌药的遗传多样性处于较高水平.     

浙江省仙居国家公园狭摇蚊属新记录种记述

记述了浙江省仙居国家公园狭摇蚊属新记录种,即赛特狭摇蚊[Stenochironomus satorui(TokunagaKuroda)],并附主要特征图。赛特狭摇蚊区别于本属其他种的主要特征有:翅中部具色斑带;第IX背板后缘具14~15根长刚毛,中部具20~22根刚毛,肛尖细长,两端平行,端部尖状;上附器短小,指状,具4~5根长刚毛;下附器条状,端部具3根刚毛,中部具1根刚毛。