谷胱甘肽-S-转移酶-ASPP2融合蛋白的原核表达及纯化

为表达并初步纯化包含ASPP2活性区域和不包含其活性区域的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-ASPP2融合蛋白。采用PCR扩增两段ASPP2基因短片段,在引物5'端和3'端分别引入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,将其克隆进入原核表达载体pGEX-4T-1;异丙基硫代-半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒pGEX-4T-1-ASPP2在大肠杆菌BL21(DE3)中表达同时带有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签的融合蛋白;超声法裂解大肠杆菌,应用谷胱苷肽琼脂糖树脂纯化可溶的GST-ASPP2融合蛋白;通过SDS-PAGE和Western blot验证GST-ASPP2融合蛋白的表达。结果表明,已成功的构建了GST-ASPP2小片段融合蛋白表达载体,在Western blot分析中,4个蛋白条带均能被鼠抗GST单克隆抗体特异性识别,条带所在位置和GST-ASPP2的分子质量相符。构建了GST-ASPP2重组质粒,在大肠杆菌BL21中高效表达GST-ASPP2融合蛋白,为进一步研究ASPP2全长,N-末端和C-末端生理意义奠定了基础。     

离婚，“离”不掉债务

赵某与王某在婚姻关系存续期间,因共同做工程,由丈夫赵某多次向梁某借款合计12万元,借据均由赵某出具。去年赵某和王某感情破裂,双方在签订离婚协议书时约定所欠梁某12万债务全部由赵某偿还。但因为数额巨大,赵某一时未能及时清偿债务,于是今年6月,梁某一纸诉状将两人告上了法庭。法庭审理认为：虽然离婚协议已对财产分割问题做出约定,但债权人仍有权就夫妻共同债务向双方主张权利。赵某和王某在夫妻关系存续期间因共同生产经营需要,虽然仅有夫妻一方向梁某出具借据,     

百姓信赖的好庭长——记肇东市人民法院昌五法庭庭长 常文沫

带着对正义的崇敬,怀着对公平的向往,1995年8月常文沫同志考入肇东法院工作。十几年来,从书记员、助理审判员、审判员、宋站法庭副庭长,到昌五法庭庭长,常文沫把最宝贵的青春年华奉献给了他所挚爱的审判事业,把满腔赤诚洒向了这片深情的沃土。     

濒危植物四合木生境适宜性变化分析

以1977年MSS及1990、2000、2005年TM影像数据为基本信息源,在RS与G IS技术支持下,选取地形、气候、人类活动指标为评价因子,借助DEM及生境评价模型,从时空尺度对濒危植物四合木的生境适宜性进行了评价与分析。结果表明：28 a来四合木的适宜生境面积不断减少,较不适宜生境面积迅速增加,研究期内已有159...     

35％赛铃灵防治棉花害虫试验示范初报

３５％赛铃灵防治棉花害虫试验示范初报杨普云，傅达昌，韩云章，杨昌林，杨秋萍（全国植保总站）（盐城市植保站）（江苏东台市植保站）吕志平，陈德喜，王明生，万桂喜（东台市农用药剂厂）（东台市农科站）３５％赛铃灵是南京农业大学承担国家八五攻关课题中的科研成果...     

新型农村合作医疗制度可持续发展问题探讨

从今年开始我国的新型农村合作医疗制度建设由试点阶段转入全面推进阶段,是新型农村合作医疗制度建设的关键一年。本文分析了制约我国新型农村合作医疗可持续发展的主要因素,提出了促进我国新型农村合作医疗可持续发展的对策与建议。