基于II型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。     

细黄链霉菌005发酵条件优化及在玉米上的应用

通过L9(34)正交试验确定了Streptomyces microflavus 005的最佳培养基.优化后的培养基含:4.5%可溶性淀粉,0.5%蔗糖,4.5%豆饼粉,0.2%NaNO3,0.01%ZnSO4,0.001%KH2PO4.在最适发酵条件下,最高生物量(干重)由17.67 g/L提高到48.3 g/L.水培和小区试验结果表明Streptomyces microflavus 005能促进玉米种苗的生长并提高产量.