香豆素对灰葡萄孢霉菌的生长代谢及保护酶活性的影响

为探究香豆素对灰葡萄孢霉菌作用机理的影响，通过酶活试验、丙二醛（MDA)含量、葡萄糖含量变化试验，来分析香豆素对灰葡萄孢霉菌体内保护酶（SOD、POD、PPO）活性的影响，探究灰葡萄孢霉菌细胞代谢活动的强弱和细胞膜损伤程度变化。运用菌丝处理对照前后菌丝干重变化的方法来进行抑菌活性测定，以及用试剂盒测定的方法来进行酶活测定、MDA含量测定、葡萄糖含量的测定。结果表明，在液体培养基中香豆素对灰葡萄孢霉菌的EC₅₀为101 μg·mL^-1；香豆素对灰葡萄孢霉菌孢内的过氧化物酶（POD）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、多酚氧化酶（PPO）的最高抑制率分别为82.7%、66.67%、56.36%；经香豆素处理的菌丝体各时间点的丙二醛（MDA）含量明显>对照组，细胞膜透性显著增强，第72 h时，处理组MDA含量为16.53 nmol·mg^-1 prot，为对照组MDA含量的1.5倍；处理组葡萄糖含量始终<对照组，第36 h与对照组相比，处理组下降了45.63%。可见，香豆素可抑制灰葡萄孢霉菌的生长，致使细胞膜菌丝膜酯损伤，抑制灰葡萄孢霉菌酶的活性，降低细胞中葡萄糖的含量，影响细胞正常代谢生长，为灰霉病的防治提供一定的理论参考。     

基于糙皮侧耳转录组测序挖掘降解木本基质的候选功能基因

采用Illumina Hi Seq 4000 SBS高通量测序平台对糙皮侧耳[Pleurotus ostreatus(Jacq.:Fr.)Kummer]的转录组进行测序,挖掘糙皮侧耳降解木质基质的候选功能基因。共得到糙皮侧耳转录本序列64 228条,单基因序列46 417条。使用Blast工具将转录本序列比对到NR、Swissprot、KEGG、String、Pfam等数据库中,并有33 736条序列得到注释。通过对差异基因的对比和筛选,得到1 408条差异表达基因,其中有1 183条基因为上调基因,通过GO富集分析表明,差异基因显著富集于木质素分解代谢过程、锰过氧化物酶活性、苯丙素分解代谢过程中。将差异基因比对到KEGG数据库中,共有313条得到注释的序列,对其进行Pathway富集分析,证明差异基因显著富集于氨基苯甲酸降解、色氨酸代谢、β-丙氨酸代谢等通路中。c27028_g1、c28624_g1、c30793_g1、c30849_g1等基因与木质素降解过程相关性较高。c24893_g1、c29559_g1、c29956_g2等基因与纤维素降解过程相关性较高。     

香豆素对灰葡萄孢霉菌抑菌作用机理初探

为探究香豆素对灰葡萄孢霉菌Botrytis cinerea作用机理的影响，通过抑菌试验、酶活试验及电导率试验，分析香豆素对灰葡萄孢霉菌的抑菌活性，以及经香豆素处理后灰葡萄孢霉菌胞内外蛋白质含量、酶活性以及细胞膜透性的变化规律，揭示香豆素对灰葡萄孢霉菌的抑菌机理。结果表明:在PD液体培养基上香豆素对灰葡萄孢霉菌的EC₅₀值为101 mg/L；处理组胞内及胞外蛋白浓度均低于对照组蛋白浓度；香豆素浓度为101 mg/L时对灰葡萄孢霉菌三磷酸腺苷酶 (ATPase) 和过氧化氢酶 (CAT) 的抑制率分别为62.60%和76.5%，对纤维素酶 (CL)、多聚半乳糖醛酸酶 (PG) 和果胶酶 (pectinase) 的抑制率分别为57.63%、64.51%和61.13%；香豆素处理可显著增强灰葡萄孢霉菌的细胞膜透性，经香豆素处理48 h，灰葡萄孢霉菌的电导率为17568.79 μS/cm，为对照组电导率的1.9倍。可见，香豆素可以抑制灰葡萄孢霉菌的生长，使其呼吸代谢受阻，干扰灰葡萄孢霉菌细胞膜的渗透，抑制灰葡萄孢霉菌细胞壁酶的活性。该结果可为以香豆素为主的新型植物源农药开发以及灰霉病的防治提供理论支撑。