不同酶解条件对普通红豆草子叶原生质体分离的影响

以普通红豆草子叶为材料,研究了预处理、酶液组合和渗透压浓度等因子对其原生质体分离效果的影响。结果表明,子叶在含有0．70mol／L甘露醇的CPW溶液中预处理60min,获得的原生质体产量、存活率均高于其他预处理;酶液组合为1．0％纤维素酶＋0．8％果胶酶＋0．5％离析酶,25℃黑暗条件下酶解6h可获得大量有较高活力的原生质体;酶解液中添加浓度为0．55mol／L的甘露醇较适合原生质体分离。     

不同培养基对苜蓿花药愈伤组织继代和分化的影响

将7种苜蓿品种(品系)(MT-2、MT-146、MT-328、MT-335、新牧1号、新疆大叶和KS220-97)的混合花药接种于N6大量元素+MS微量元素+MS铁盐+B5有机物+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.5 mg/L的固液双层培养基上,诱导出愈伤组织,再转接到不同成分及添加物的培养基中培养,观察培养效果.结果表明:①在含MS、SH、N6的大量元素的培养基上的初代培养, MS或SH的效果好于N6,愈伤组织第5～9次继代培养中,N6大量元素培养基的继代培养效果最好.②花药愈伤组织继代培养基中添加AC、LH、PVP-40对愈伤组织的生长和防止褐变有明显作用.③继代培养中期,添加NAA超过0.5 mg/L时易褐化.④在N6大量元素培养基上的愈伤分化、生长表现好于其它培养基,1/2MS大量元素次之.⑤在分化培养的后期不加激素,有利于愈伤组织的生长.     

不同酶液组合及酶解时间对普通红豆草原生质体游离的影响

以普通红豆草的下胚轴、愈伤组织为材料,研究了不同的酶种类及组合、酶液浓度、酶解时间等因子对其原生质体游离的影响.结果表明,愈伤组织作为原生质体游离材料好于下胚轴;红豆草愈伤组织在1.0% cellulose 0.8% Macerase 0.5% macerozyme R-10的酶液中酶解6 h为较理想的原生质体酶解条件.     

不同酶解条件对普通红豆草下胚轴原生质体分离的影响

对普通红豆草原生质体分离条件进行研究.以无菌发育5～7 d种子的下胚轴为材料,研究了不同的酶组合、酶解时间、渗透压和pH等因子对其原生质体游离的影响.结果表明:当酶液组合为2;纤维素酶+0.5;果胶酶+0.3;离析酶,25℃黑暗条件下酶解6 h可获得大量有较高活力的原生质体,其产量达到3.53×106个/g,存活率为90.6;;以甘露醇作为酶解渗透调节物质较为理想,酶解液中添加浓度为0.55 mol/L的甘露醇最为适合原生质体分离;酶解液pH调至6.0时原生质体产量、活力均高于其他各组.