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细胞穿膜肽是一类能携带大分子物质进入细胞的短肽,其穿膜能力不依赖经典的胞吞作用。本研究构建了含有细胞穿膜肽pep-1和病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ（viral macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ）的融合表达质粒pET15b-pep-1-vMIP-Ⅱ,并将其转化大肠杆菌BL21（DE3）plysS中经IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定出可溶性的融合蛋白pep-1-vMIP-Ⅱ。通过对IPTG浓度、温度等诱导表达条件进行优化,确定在IPTG浓度为0.2mmol/L、28℃下诱导7h可溶性蛋白的表达量相对较高,经Ni-NTA亲和层析,超滤除盐纯化获得高纯度的融合蛋白pep-1-vMIP-Ⅱ,将该蛋白作用于Hela细胞,激光共聚焦显微镜观察结果显示该融合蛋白能够携带目的基因穿透细胞膜。本文结果将为进一步研究vMIP-Ⅱ的功能和细胞穿膜肽技术的应用奠定基础。 相似文献
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<正>农村土地流转是加快农业产业结构调整,促进农业规模经营,实现农业资源高效利用和生产要素优化配置的必然选择。近年来哈拉合少乡在积极引导和推进农村土地承包经营权流转方面做了大量工作和有益探索。一、土地流转现状哈拉合少乡农村土地流转形式主要有转包、互换、出租等几种。截止2013年6月,全乡土地流转面积达3.5万亩,涉及农户1200余户,分别占全乡承包面积的30%和农业户数的25%。随着农业产业化、工 相似文献
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