桑黄原生质体的制备与再生研究

为了了解不同桑黄分离的原生质体活力、产量和再生能力是否相同,采用酶解法处理桑黄菌株菌丝体获得原生质体。比较分析五种生长在不同树种上的桑黄菌丝的原生质体活力和产量、葡萄糖和p H对原生质体再生的影响,并对暴马丁香桑黄原生质体释放与再生过程进行显微摄影观察。结果显示:暴马丁香桑黄的活力与产量最高分别为81.82%和3.85×105个/m L。在p H 7、葡萄糖浓度为30 mg/m L时,暴马丁香桑黄原生质体再生率达最高,分别为23.67%和19.33%。初步摸索通过酶解法制备桑黄原生质体和原生质体释放与再生的过程。     

促进桑黄次生代谢物累积的碳氮比及碳氮源优化研究

为促进桑黄次生代谢物累积,以仅添加碳源和氮源的培养基培养桑黄菌丝体,采用比色法测定菌丝中黄酮、多酚、甾醇以及三萜含量。结果表明:碳氮比在60∶1～100∶1的试验范围内,黄酮、多酚和甾醇含量均在碳氮比为80∶1时达到最高,其单位含量分别为168.27,6.70,7.95mg·g~(-1),而三萜含量在碳氮比为100∶1时达最高,为4.17mg·g~(-1);在此基础上,优化了蔗糖、果糖、葡萄糖和乳糖为碳源和硝酸铵、碳酸铵和硝酸钠作为氮源的碳氮组合,黄酮、多酚和甾醇含量均在葡萄糖和碳酸铵组合下达到最高,其单位含量分别为251.45,4.68,10.48mg·g~(-1),而三萜含量在乳糖和碳酸铵组合下达到最高,为35.78mg·g~(-1)。由上述结果可知,适合桑黄菌丝次生代谢物积累的碳氮比为80∶1,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和碳酸铵。