以葛根为基质的灵芝发酵和体外清除自由基活性研究

[目的]研制一种具有抗氧化作用的新型保健食品并研究其体外抗氧化活性。[方法]以灵芝为发酵菌株,葛根为发酵基质中的添加物,研究了葛根对灵芝菌丝体生长和发酵产物体外清除自由基活性的影响。[结果]葛根添加量为60g/L时,灵芝的生物量达最大值,即（9．76±0．37）g／L,比对照高2．82g／L。葛根具有清除羟自由基和超氧阴离子的能力,添加葛根的灵芝发酵产物的对羟自由基和超氧阴离子的清除效果明显比单独灵芝发酵好。当葛根浓度为20、40、60、80和100eeL时,发酵产物对羟自由基的清除率分别为67．2％、78．5％、84．9％、86．4％和87．3％,对超氧阴离子的清除率分别为35．42％、41．67％、46．88％、44．79％和45．88％。[结论]该研究为开发具有抗氧化作用的新型灵芝发酵保健食品提供了理论基础。     

食用菌复合保健饮料的研制

[目的]为食用菌的开发利用提供新途径。[方法]以猴头菇、灵芝、虫草等食用菌水提液为主要原料,添加功能性能量因子D-核糖及其他辅料,研制食用菌复合保健饮料,通过单因素试验研究澄清剂用量对混合浸提液的澄清效果,通过正交试验优选饮料的最佳生产配方。[结果]澄清剂的最佳用量为8%;各因素对食用菌复合保健饮料感官指标的影响依次为：灵芝提取液量〉猴头菇提取液量〉D-核糖量〉虫草提取液量;饮料的最佳生产配方为：猴头菇水提液8%,虫草提取液6%,D-核糖2.5%,灵芝提取液22%。超高温瞬时灭菌对饮料中D-核糖含量的影响不显著。[结论]建立了食用菌复合饮料的最佳制备工艺。     

杜仲叶粉提取绿原酸工艺的优化

[目的]优选杜仲叶粉中绿原酸的最佳提取方法和提取工艺,为工业化生产提供参考。[方法]用酶解和超声相结合的方法,在单因素试验的基础上,采用四因素三水平正交设计法对提取工艺条件进行优选。[结果]单因素试验结果得出,在溶剂pH值为4.5,酶加入量为0.6%,酶解温度为40℃,料液比为1∶10,超声时间为30 min,绿原酸提取得率最大。在此基础上进行的正交试验结果显示,绿原酸提取的最佳工艺条件为:溶剂pH值为5.0,酶解温度为40℃,料液比为1∶10,超声时间为30 min,在此最佳条件下绿原酸提取得率可达3.05%。从与酶法和超声波法的比较试验得出,绿原酸提取得率比酶解高出5.54%,比超声波提取高出16.68%。[结论]采用酶解与超声波结合的方法,先让酶作用后,有利于超声波的进一步作用,促进绿原酸的释放,提取效果远远超过酶法和超声波法。     

菌渣蛋白肽的制备及其抗氧化肽的分离鉴定

以发酵菌渣(糠)为原料制备活性肽,选用纤维素酶、食用菌酶A02和酵母抽提酶水解发酵菌糠,酶解液经浓缩冷冻干燥后制成蛋白肽粉,以DPPH抗氧化性为指标,经Sephadex G-25凝胶层析和RP-HPLC进行分离纯化,DPPH清除率最高的采用液质联用鉴定结构组成。试验结果表明,酶解最适条件为纤维素酶,酶解温度50℃,p H 4.8,酶的添加量0.7%,酶解时间60 min;食用菌酶A02和酵母抽提酶的最佳酶解工艺为温度55℃、p H6.5、酶解时间240 min,酶量分别添加0.5%和1%;获得的肽粉多肽含量达67%,其中分子量小于2000 Da的占95.74%。经Sephadex G-25凝胶柱脱盐和制备型RP-HPLC分离纯化,得到DPPH清除率最高为45.73%的组分,经液质联用鉴定该组分含有相对分子质量为475.2 Da,氨基酸序列为GluSer-Ala-Gly-Leu的肽段。     

禽白血病受体基因Tva和Tvb在大午粉蛋鸡中的分布研究

为研究抗A亚群禽白血病病毒受体基因(Tva)、抗B亚群禽白血病病毒受体基因(Tvb)易感和抗性等位基因在大午粉蛋鸡中的分布,试验选择健康的大午粉父母代蛋鸡35只,利用直接测序法进行基因分型并用BioEdit和Chromas软件进行序列比对分析,计算易感性和抗性等位基因的基因频率及基因型频率。结果表明:在所检测的大午粉商品蛋鸡中,Tva均为抗性等位基因Tvar3,其在内含子1区存在ACCCCGCCCC片段的缺失,并且缺失片段前的5个碱基突变为GCCCC; Tvb均为易感型,即Tvbs1(172C)和Tvbs4(184TG),其中Tvbs4中T、G等位基因频率分别为0. 81,0. 19,TT、TG和TT基因型频率分别为0. 62,0. 38和0. 00。说明大午粉蛋鸡群体中Tva基因为抗性等位基因,为培育禽白血病抗性品种提供了育种素材。     

杜仲叶提取物对鲫鱼出血性病原菌抑菌试验的研究

试验测定了杜仲叶主要提取物绿原酸对水产养殖中常见病原菌的最小抑菌浓度及其对嗜水气单胞菌体内和体外抑菌效果。结果显示,绿原酸对水产养殖中的常见病原菌嗜水气单胞菌最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均为250mg/l,哈维氏弧菌、苏伯利产气单胞菌的MIC与MBC均为500mg/l,肠型点状产气单胞菌的MIC与MBC分别为500、1000mg/l。药敏试验结果发现,绿原酸对嗜水气单胞菌抑菌圈的直径为(19.4±1.2)mm,氟哌酸的抑菌圈直径为(30.3±1.3)mm,土霉素为(28.5±2.5)mm。攻毒试验结果显示,在攻毒7d后,对照组死亡率为45%,饲料中添加0.5%绿原酸的试验组死亡率为10%,添加4%的试验组的死亡率为20%,添加1%和2%的试验组没有鱼死亡,表明饲料中添加1%的绿原酸能有效增强鱼体对嗜水气单胞菌的抵抗能力。试验结果说明,绿原酸对水产养殖中常见的病原菌具有良好的抑菌效果,对嗜水气单胞菌的抑菌效果与抗生素类抗菌药物相当,能够增强机体免疫力,对细菌性疾病具有较强的预防作用。