三叶草RAPD反应条件的优选

以红三叶(Trifolium pretense L.)、白三叶(Trifolium repens L.)和杂三叶(Trifolium Hybridum L.)三种三叶草为材料,对RAPD反应条件中的dNTP浓度、随机引物浓度、模板DNA用量、Taq DNA聚合酶用量、退火温度以及预变性时间分别进行梯度试验.结果表明,该反应体系体积为25 μL:ddH2O,19.1 μL;10×Buffer,2.5 μL;Primer,200 nM;dNTP,200μM;Taq DNA聚合酶,1U;Template DNA 1ng/μL.通过试验建立了一套稳定的RAPD反应体系,该反应体系扩增效果良好.